"MuM-2C Cell|人眼脈絡黑色素瘤細胞

細胞背景資料：脈絡膜；黑色素瘤

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

Hs294T細胞類似產(chǎn)品：：MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞

NCIH1105細胞類似產(chǎn)品：：ST 486細胞、LLCMK2細胞、Detroit 562細胞

P3.653細胞類似產(chǎn)品：：Ect1/E6E7細胞、HuP-T4細胞、High Five細胞

NCIH1155細胞類似產(chǎn)品：：LS 1034細胞、Jurkat-E6細胞、He-La細胞

CFPAC細胞類似產(chǎn)品：：HEK-A細胞、RPMI8402細胞、WM115F細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MuM-2C Cell|人眼脈絡黑色素瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做HAO標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

DH-82細胞類似產(chǎn)品：：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞

MESSADX5細胞類似產(chǎn)品：：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞

H220細胞類似產(chǎn)品：：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞

NCI-SNU-216細胞類似產(chǎn)品：：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

DH-82細胞類似產(chǎn)品：：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞

MESSADX5細胞類似產(chǎn)品：：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞

H220細胞類似產(chǎn)品：：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞

NCI-SNU-216細胞類似產(chǎn)品：：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

SN12C細胞類似產(chǎn)品：：H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞

KP-2細胞類似產(chǎn)品：：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞

H-716細胞類似產(chǎn)品：：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞

SBC-3細胞類似產(chǎn)品：：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞

Detroit-562細胞類似產(chǎn)品：：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞

SNU668細胞類似產(chǎn)品：：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞

KYSE-180細胞類似產(chǎn)品：：SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞

AD-293細胞類似產(chǎn)品：：C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、Hs 888Lu細胞

WISH細胞類似產(chǎn)品：：OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞

Colo16細胞類似產(chǎn)品：：HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞

MuM-2C Cell|人眼脈絡黑色素瘤細胞

MDCK細胞類似產(chǎn)品：：SK-BR-3細胞、PNEC30細胞、293/EBNA-1細胞

CT26.WT細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞

NHA細胞類似產(chǎn)品：：MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞

SK-MEL2細胞類似產(chǎn)品：：COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞

RT-4細胞類似產(chǎn)品：：CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞

OCI Ly1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞

RLE-6TN細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞

BetaTC6細胞類似產(chǎn)品：：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞

KASUMI1細胞類似產(chǎn)品：：9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞

H322細胞類似產(chǎn)品：：P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞

Hs 695T細胞類似產(chǎn)品：：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞

RA 1細胞類似產(chǎn)品：：NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞

H3255_DA細胞類似產(chǎn)品：：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞

Capan1細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞

H-711細胞類似產(chǎn)品：：GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞

OVCAR420細胞類似產(chǎn)品：：SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞

Y3細胞類似產(chǎn)品：：KLN205細胞、MuM-2B細胞、hRMECs細胞

Fetal Human Colon細胞類似產(chǎn)品：：GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞

H2030細胞類似產(chǎn)品：：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞

MHH-CALL-2細胞類似產(chǎn)品：：HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞

KP-N-NS細胞類似產(chǎn)品：：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞

H-719細胞類似產(chǎn)品：：Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞

UWB1-289細胞類似產(chǎn)品：：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞

X63-Ag8.653細胞類似產(chǎn)品：：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞

OVCAR 4細胞類似產(chǎn)品：：TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞

MGHU3細胞類似產(chǎn)品：：MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞

H-508細胞類似產(chǎn)品：：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞

HEK 293細胞類似產(chǎn)品：：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞

RKOAS451細胞類似產(chǎn)品：：T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞

MuM-2C Cell|人眼脈絡黑色素瘤細胞

LLC-MK2細胞類似產(chǎn)品：：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞

PC-3M-IE8細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞

3 LL細胞類似產(chǎn)品：：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞

Y3-Ag123細胞類似產(chǎn)品：：C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞

NCI-H2030細胞類似產(chǎn)品：：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞

CCC-ESF-1細胞類似產(chǎn)品：：H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞

ML-2細胞類似產(chǎn)品：：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞

GEO細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞類似產(chǎn)品：：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞

38C13細胞類似產(chǎn)品：：YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞

ECC12細胞類似產(chǎn)品：：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞

OSC19細胞類似產(chǎn)品：：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞

COLO 320HSR細胞類似產(chǎn)品：：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞

EFM19細胞類似產(chǎn)品：：HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞

G-292, clone A141B1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 766.T細胞、SCC-1395細胞、MT4細胞

BL1339細胞類似產(chǎn)品：：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞

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