"M-1 Cell|小鼠腎集合管細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：腎集合管；SV４０轉(zhuǎn)化

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

SKRC 39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞

DLD 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC-3細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞

NP69細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2023細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、SBC3細(xì)胞

16-HBE14o細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SN12-PM6細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞

Anglne細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC-9/GR細(xì)胞、AMO1細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

M-1 Cell|小鼠腎集合管細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

EFM192C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞

SF 539細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞

A-704細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞

HS-68細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

EFM192C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞

SF 539細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞

A-704細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞

HS-68細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞傳代比例：對(duì)于有限細(xì)胞系，傳代時(shí)以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對(duì)應(yīng)1次倍增，4對(duì)應(yīng)2次倍增，8對(duì)應(yīng)3次倍增，16對(duì)應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時(shí)要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時(shí)以內(nèi))，可重新進(jìn)入生長(zhǎng)周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺(tái)期。

OVCAR-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞

TOV21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1563細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞

HT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞

143BTK-細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞

P19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞

HOS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：S16細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞

SU-DH-L5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC 61細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞、EBTr細(xì)胞

SNU-C2A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AAV293細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞

Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT-8細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞

HSC-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞

M-1 Cell|小鼠腎集合管細(xì)胞

H-35細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP 4細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞、BSC1細(xì)胞

Hs895T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞

SKNDZ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞

TE-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞

EoL-1 cell細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs746-T細(xì)胞、NGP細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞

DMS 153細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs852T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞

DMS 153細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs852T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞

Walker-256-TC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CWR22R細(xì)胞、EFM192細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞

TM4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UC-3細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞、TE-11細(xì)胞

NCI-H64細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HepaRG細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞

ECV細(xì)胞類似產(chǎn)品：：S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞

Anip-973細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞

SaOS-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A2058細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞

MFE-280細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞

H1963細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK Col 1細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞

MonoMac6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS53細(xì)胞、SUM190細(xì)胞、NCI-H810細(xì)胞

Pt K2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mouse podocyte細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞、KM12細(xì)胞

Tca-8113細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM12細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞、NP-69細(xì)胞

P3X63Ag8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞

OAW 42細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞

ETCC007細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞

KMS-18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞

SW 1990細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLE12細(xì)胞、NB19細(xì)胞、R2C細(xì)胞

HEK293EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞

FL 62891細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞

Hs888T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C4 I細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞、GOS3細(xì)胞

HFL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞

SUM-52-PE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 175 VII細(xì)胞、HN13細(xì)胞、HuH1細(xì)胞

KYSE-150細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞

M-1 Cell|小鼠腎集合管細(xì)胞

H-2106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞

LC1/Sq細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 822.T細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞

TK 10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞

SCC-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1048細(xì)胞、TE7細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞

HSC-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞

LN-18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SLK細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞

MES 13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCA38細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞

SNU869細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞

SKRC-20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞

CAL120細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IMR90細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞、RK-13細(xì)胞

SF 767細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TSUpr1細(xì)胞、ESC細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞

CPAE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OSRC2細(xì)胞、LS411細(xì)胞、SW48細(xì)胞

no.11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞

ME1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞

CP-70細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MHCC97-H細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞

Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞

U138細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞

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