"C8161 Cell|人黑色素瘤細胞

細胞背景資料：皮膚黑色素瘤；腹壁轉(zhuǎn)移；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。

細胞生長：貼壁

Bat lung細胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞

AA-Mel細胞類似產(chǎn)品：：SW1463細胞、B10BR細胞、LN 229細胞

OsACL細胞類似產(chǎn)品：：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、BT-20細胞、H-2170細胞

Caco2-BBE細胞類似產(chǎn)品：：Hs729細胞、C33-A細胞、H-4-II-E細胞

MA-c細胞類似產(chǎn)品：：Hs 695T細胞、NR 8383細胞、Pa017C細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

C8161 Cell|人黑色素瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

HOSEpiC細胞類似產(chǎn)品：：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞

SNU620細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞

LY-R細胞類似產(chǎn)品：：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞

Central Adrenergic TH-expressing a細胞類似產(chǎn)品：：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

HOSEpiC細胞類似產(chǎn)品：：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞

SNU620細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞

LY-R細胞類似產(chǎn)品：：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞

Central Adrenergic TH-expressing a細胞類似產(chǎn)品：：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

Kit225 K6細胞類似產(chǎn)品：：2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞

NCIH1385細胞類似產(chǎn)品：：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞

COV434細胞類似產(chǎn)品：：SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞

Human Corneal Endothelial Cells-12細胞類似產(chǎn)品：：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞

SKG-IIIa細胞類似產(chǎn)品：：IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞

C-4 I細胞類似產(chǎn)品：：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞

DMS-53細胞類似產(chǎn)品：：HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞

MC57G細胞類似產(chǎn)品：：HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞

GT38細胞類似產(chǎn)品：：TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞

OVCA433_Bast細胞類似產(chǎn)品：：AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞

C8161 Cell|人黑色素瘤細胞

BALB/3T3 clone A31細胞類似產(chǎn)品：：CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞

190PT細胞類似產(chǎn)品：：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞

C4-I細胞類似產(chǎn)品：：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞

BRL-3A細胞類似產(chǎn)品：：Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞

SCC90細胞類似產(chǎn)品：：COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞

HPAEC細胞類似產(chǎn)品：：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞

HPAEC細胞類似產(chǎn)品：：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞

Panc5.04細胞類似產(chǎn)品：：Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞

SNU869細胞類似產(chǎn)品：：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞

Kit-225-K6細胞類似產(chǎn)品：：OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE-8.1/2細胞

Tsup-1細胞類似產(chǎn)品：：CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞

DR2R1610細胞類似產(chǎn)品：：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞

L-6TG細胞類似產(chǎn)品：：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞

PK (15)細胞類似產(chǎn)品：：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞

SK-NEP-1細胞類似產(chǎn)品：：SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞

MCA38細胞類似產(chǎn)品：：U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞

HLE-SRA-01/04細胞類似產(chǎn)品：：Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞

L- cell細胞類似產(chǎn)品：：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞

HEK293EBNA細胞類似產(chǎn)品：：OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞

NCIH647細胞類似產(chǎn)品：：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞

RBSMC細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞類似產(chǎn)品：：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞

NT2/D1細胞類似產(chǎn)品：：H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞

T47-D細胞類似產(chǎn)品：：L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞

HCT15細胞類似產(chǎn)品：：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞

IB-RS2細胞類似產(chǎn)品：：SW-1417細胞、MKN-45細胞、OUMS-23細胞

KLN-205細胞類似產(chǎn)品：：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞

MDA231-LM2-4175細胞類似產(chǎn)品：：CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞

Lewis Lung Cancer細胞類似產(chǎn)品：：Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、HEL-1細胞、Caki-1細胞

C8161 Cell|人黑色素瘤細胞

IM9細胞類似產(chǎn)品：：Chang Cells細胞、W256細胞、FTC133細胞

Mevo細胞類似產(chǎn)品：：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞

SUM 149PT細胞類似產(chǎn)品：：3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞

FC33細胞類似產(chǎn)品：：MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞

SVHUC細胞類似產(chǎn)品：：H-2052細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、NCI-H716細胞

ZR751細胞類似產(chǎn)品：：PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞

PT-67細胞類似產(chǎn)品：：Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞

McARH7777細胞類似產(chǎn)品：：NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞

HMCB細胞類似產(chǎn)品：：Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞

ECC 12細胞類似產(chǎn)品：：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞

MLE 12細胞類似產(chǎn)品：：MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞

HuTu-80細胞類似產(chǎn)品：：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞

SJ-Rh 30細胞類似產(chǎn)品：：LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞

NS1-Ag4/1細胞類似產(chǎn)品：：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞

HCEC細胞類似產(chǎn)品：：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞

B958細胞類似產(chǎn)品：：J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞

HEK/EBNA細胞類似產(chǎn)品：：K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞

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