"WiDr Cell|人結(jié)直腸癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：結(jié)腸癌；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對延長。

細(xì)胞生長：貼壁

SW948細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL1-5細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞

HT-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE353.SK細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞

Bat lung細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LTEP-sm細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞

H1666細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 888.Lu細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、MB157細(xì)胞

MCF-7ADR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、CoC1細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

WiDr Cell|人結(jié)直腸癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

ATN-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit 225細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞、H1915細(xì)胞

149 PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞

IMR-90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC1細(xì)胞、WILL2細(xì)胞、MIN6細(xì)胞

SV-HUC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AD-293細(xì)胞、231-luc細(xì)胞、NCM356細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

ATN-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit 225細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞、H1915細(xì)胞

149 PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞

IMR-90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC1細(xì)胞、WILL2細(xì)胞、MIN6細(xì)胞

SV-HUC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AD-293細(xì)胞、231-luc細(xì)胞、NCM356細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞傳代比例：對于有限細(xì)胞系，傳代時(shí)以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對應(yīng)1次倍增，4對應(yīng)2次倍增，8對應(yīng)3次倍增，16對應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時(shí)要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時(shí)以內(nèi))，可重新進(jìn)入生長周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺期。

751-NA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EFO27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞、138MG細(xì)胞

OAW 42細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞

GL-261細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞

HCC44細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞

H250細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞

HCC-827細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7B細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞、SW 527細(xì)胞

TE-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat clone A3細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞、NRK細(xì)胞

MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Chinese Hamster Lung細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞

NCI-H1522細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H441細(xì)胞、GM03671細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞

CA922細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLT4細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞

WiDr Cell|人結(jié)直腸癌細(xì)胞

NCI522細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-kb2細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞

BC-020細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-8161細(xì)胞、Vero E6細(xì)胞、B-16細(xì)胞

TE-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞

H446細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUIT 2細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞、SF 767細(xì)胞

A-1847細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SL-29細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞

PL-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE-29細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞

PL-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE-29細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞

H4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M1細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞、SNU761細(xì)胞

Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21細(xì)胞、VP 267細(xì)胞、KBM5細(xì)胞

brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NH-6細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞

PE/CA-PJ-34細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-OV-433細(xì)胞、SUM52細(xì)胞、S-16細(xì)胞

SF539細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K562細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞

BT325細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY細(xì)胞、J82細(xì)胞、HuH7細(xì)胞

SACC-83細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞

Human Kidney-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞

HSKMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C8166-CD4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、SIRC細(xì)胞

293GP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞

RL95細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MMVECs細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞

CCD-18Co細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TW 01細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞

SUM149PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1954細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞

RFL-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNUC2B細(xì)胞、PG13細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞

MOLM-14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-643細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞

CCRF/CEM/0細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞

LS123細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞

MNNG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞

NCI-H524細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DHL8細(xì)胞、IMR32細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞

CaSki細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSF2細(xì)胞、EL 4細(xì)胞、KMS26細(xì)胞

HSC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞

CT26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-EMC-SS細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞、H-526細(xì)胞

WiDr Cell|人結(jié)直腸癌細(xì)胞

B16-F10-BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞

HuPT4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞

NEC8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞

E.G7-OVA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞

LM-TK-細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞

SKMEL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞

HSC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293 H細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞、WI-38細(xì)胞

8305C_1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2087細(xì)胞、P-815細(xì)胞、H345細(xì)胞

8305C_1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2087細(xì)胞、P-815細(xì)胞、H345細(xì)胞

HCC-1419細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Adeno 293細(xì)胞、MCFs細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞

SUDHL4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3-Swiss albino細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、GM0637細(xì)胞

EBC-1/original細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caki-2細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞、AN-3細(xì)胞

Granta 519細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HET-1A細(xì)胞、J 774A.1細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞

CORL51細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞

HEK293T/17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNSH細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞

NMC-G1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MB157細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞、PanC1細(xì)胞

U-138-MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-GT-2細(xì)胞、HNSC細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞

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