"NTERA-2 Cell|人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：畸胎瘤；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

L-540細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FRO 81-2細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞

SK-MEL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BV173細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、HLFa細(xì)胞

HR8348細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DHL10細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞、293-FT細(xì)胞

MONO-MAC 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2135細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞

HT 1080.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細(xì)胞、H2591細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NTERA-2 Cell|人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

OV1/P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CA46細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞、CCD18細(xì)胞

P3HR1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞

H1666_DA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞

LS-411細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

OV1/P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CA46細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞、CCD18細(xì)胞

P3HR1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞

H1666_DA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞

LS-411細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

SUP-M2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW1271細(xì)胞、D283MED細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞

WSU-HN13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI 8402細(xì)胞、H2073細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞

201T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞

NBL-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMRC-2細(xì)胞、Simpson細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞

MRMT-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOEC細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞、CORL88細(xì)胞

REC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H-82細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞

H-2342細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞

SUDHL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LP-1細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞、8226細(xì)胞

HNEpC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat-77細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞、C4-I細(xì)胞

SF-126細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞

NTERA-2 Cell|人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞

NCIH2591細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KS-SLK細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞

Vero 76 clone E6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞

C4-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE80UBC細(xì)胞、HeLa S 3細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞

HSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-596細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞

210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C32 [Human melanoma]細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞

BLO11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H508細(xì)胞、H522細(xì)胞、C918細(xì)胞

BLO11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H508細(xì)胞、H522細(xì)胞、C918細(xì)胞

HCC-78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H358細(xì)胞、RPMC細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞

SKG-3a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TALL1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞

TCam-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMES-1細(xì)胞、NB-9細(xì)胞、HFF細(xì)胞

H2052_MM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-368細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞

HPaSteC(HPSC)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H-10T1/2細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞

TGBC11TKB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞

MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Chinese Hamster Lung細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞

LM(TK-)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞

UMNSAH/DF#1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞

ANA1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-127細(xì)胞、KBM7細(xì)胞、H-2081細(xì)胞

NCI-H719細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞

DHL5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16 BL6細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞、PL-12細(xì)胞

MSB-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞

P31 FUJ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB453細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞

Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞

CHP 212細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞

KU 19-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Bovine Turbinate細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞

CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2227細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞

NCIH1184細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AU-565細(xì)胞、H498細(xì)胞、H-847細(xì)胞

U251MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞

HuT-78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LLC-PK1細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、LS-513細(xì)胞

WEHI3B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OS-732細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞、Madison細(xì)胞

NTERA-2 Cell|人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞

TMD8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH/DF-1細(xì)胞、H-1915細(xì)胞、SNU387細(xì)胞

SNU-668細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mac-1細(xì)胞、EU-4細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞

Hs 766細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞

H-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞

MADB106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JEG3細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞

BLO-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3-Swiss細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、16HBE細(xì)胞

SN12CPM6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞

HCT8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞

HCT8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞

CAL-85-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW837細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞

MONO-MAC 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2135細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞

D-283細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NP69細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞

TERT-RPE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT-55細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞

MESSA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞

NCIH1793細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞

U-266細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EA.hy 926細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞

Hs27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K299細(xì)胞、OS-732細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞

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