"GC-2spd(ts) Cell|小鼠精母細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：精母細(xì)胞；SV４０轉(zhuǎn)化；BALB/c

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

GM-3573細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CCD18細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞

KYSE50細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HMVEC細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞、T173細(xì)胞

OCIAML5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Leukemia 1210細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞

Melanoma 14細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：T. T細(xì)胞、NS1細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞

130-T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HN6細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

GC-2spd(ts) Cell|小鼠精母細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴(lài)支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類(lèi)的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周?chē)?，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

P3X63 Ag8.653細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞

GM03320細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞

Bx-PC3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs832T細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞、L78細(xì)胞

LK 2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

P3X63 Ag8.653細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞

GM03320細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞

Bx-PC3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs832T細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞、L78細(xì)胞

LK 2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類(lèi)或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

L 540細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：JKT1細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞

SHP77細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞

H-740細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UACC 812細(xì)胞、H-1436細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞

BALL-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞

HOP-92細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞

MFE296細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SU-DHL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、HBL1細(xì)胞

Sp2/O細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：X63-AG 8.653細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞、SCC4細(xì)胞

SKO007細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L1210細(xì)胞、BL-6細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞

GES-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞

ATDC5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞

GC-2spd(ts) Cell|小鼠精母細(xì)胞

RS(4;11)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞

LS513細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞

BSC1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Granta-519細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞、H69/P細(xì)胞

RetroPack PT67細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞

COLO-16細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞

RGE細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 683.T細(xì)胞、L615細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞

COLO 320 HSR細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DR2R1610細(xì)胞、E0771細(xì)胞、H-498細(xì)胞

H-211細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUM 190細(xì)胞、HT1197細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞

HFT-8810細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞

OV1063細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KYSE-30細(xì)胞、Colon38細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞

SKN-SH細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs606細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞

TE11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞、U2OS細(xì)胞

LS411N細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞

Karpas 422細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞

GM02219細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KMY1022細(xì)胞、KP-2細(xì)胞、MDA 231-LM2-4175細(xì)胞

HCC1419細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞

Clone 166細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CCD-33Co細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞

KM-H2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞

HTR-8/SVneo細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DV-90細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞、PC-12細(xì)胞

HT-144細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RMC-1細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、Line 522細(xì)胞

WM115F細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞

Tsup-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞

RT-BM 1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞

NCI-H711細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞

526-mel細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MMAc-Serum Free細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞

DMS273細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞

HCC0078細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞

KMS-26細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ARH-77細(xì)胞、H-2110細(xì)胞、HME1細(xì)胞

A375mel細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞

GC-2spd(ts) Cell|小鼠精母細(xì)胞

HCO細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU368細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞、SJSA-1細(xì)胞

NB-9細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞

PLC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞

SNU886細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Huh 7.5細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞

KYSE 30細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P3HR1細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞

T47D細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：AR-42J細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞

SW1990細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞

HUTU80細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞

HMVEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI H226細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞、H4細(xì)胞

EB-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞

NCI-H-69細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DHL-8細(xì)胞、HCT116細(xì)胞、Fao細(xì)胞

HL-7702細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Ly3細(xì)胞、H508細(xì)胞、BPH1細(xì)胞

Hs-746T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NOZAWA細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞

CAKI.1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-ChA1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞、HGMC細(xì)胞

RMS 13細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1793細(xì)胞、EBC1細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞

C57/B6-L細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs611T細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞

OVCAR.3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞

"