"Hs 578Bst Cell|人正常乳腺細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：乳腺細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

B16-F10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞

SUDHL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-M (TK-)細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞、T98細(xì)胞

IPLB-SF-21-AE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMEL24細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞、Hs68細(xì)胞

RKOAS451細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、H358細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞

H19-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、JM1細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

Hs 578Bst Cell|人正常乳腺細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

G-402細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FU-MMT-1細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞

RL-95-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-ES-1細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞

mIMCD-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR4細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞、H1882細(xì)胞

SNU-398細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NOZ細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、NF639細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

G-402細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FU-MMT-1細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞

RL-95-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-ES-1細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞

mIMCD-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR4細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞、H1882細(xì)胞

SNU-398細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NOZ細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、NF639細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

SK-GT-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞

RPMI no. 8226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHT-101細(xì)胞、G292細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞

GBCSD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vx2細(xì)胞、IGROV細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞

EAC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-373 MG細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞

SK-ES-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CD18/HPAF細(xì)胞、GCT細(xì)胞、N87細(xì)胞

HSC-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞

Renal Carcinoma細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LNCaP subline C4-2細(xì)胞、H9c2細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞

HOP-62細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LK2細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞、T24細(xì)胞

NCIH1568細(xì)胞類似產(chǎn)品：：THEECs細(xì)胞、118 MG細(xì)胞、RPMC細(xì)胞

HIT clone T15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞

Hs 578Bst Cell|人正常乳腺細(xì)胞

H-226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RSC96細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞

Hs-578-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2196細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞、H-2228細(xì)胞

TCC-PAN2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞

A-704細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞

BV173細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞

HTori-3.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEL-7405細(xì)胞、TEC細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞

NSC34細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTera 2/cl.D1細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞

RCC10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LAPC4細(xì)胞、H2108細(xì)胞、P116細(xì)胞

PLC-PRF-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH345細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞、207細(xì)胞

EBNA293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC-I細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞

HCC-2108細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Embryonic Skin細(xì)胞、N-9細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞

CHO/dhFr-細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDBK細(xì)胞、NOK細(xì)胞、HT 115細(xì)胞

RBL-I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PFSK1細(xì)胞、B16細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞

SK.MEL.5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞

SHIN-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞

SCC154細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Plaepi 34細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞、BHT101細(xì)胞

GAK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞

Caco2BBe細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞

HCT-116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TGW-I-nu細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞、HCET細(xì)胞

RA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞

C4 I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞

CA46細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-69細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞

Capan-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞

786-0細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH716細(xì)胞、TOG細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞

143B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JVM2細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞

JAR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SkChA-1細(xì)胞、BL1339細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞

CEMC7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPDLF細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞

Calu3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞

NCI-H2291細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1299細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞、H1435細(xì)胞

Hs 578Bst Cell|人正常乳腺細(xì)胞

UCLA-SO-M14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C22細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞

GM15452細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞

CEM-CCRF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLC-8024細(xì)胞、A7r5細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞

P560細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞

SAOS 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EO771細(xì)胞、SU.86細(xì)胞、Toledo細(xì)胞

SU 86.86細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞

ECC-12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCC10細(xì)胞、SCL1細(xì)胞、Lec1細(xì)胞

SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MAntle cell VERona-1細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞、J111細(xì)胞

hSCC-25細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞

H841細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞

SU-DHL-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞

BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHO K1細(xì)胞、SF17細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞

7860細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞

PC-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞

TALL-104細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mino細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞

MDA-175細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tn-5細(xì)胞、KY180細(xì)胞、M4e細(xì)胞

MOLT 3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BC-009細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞

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