"CAL-148 Cell|人乳腺癌細胞

細胞背景資料：乳腺癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

KG-1細胞類似產(chǎn)品：：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞

LU-65M細胞類似產(chǎn)品：：OE19細胞、PG-BE1細胞、MFE296細胞

SKGT4細胞類似產(chǎn)品：：BEND細胞、Hs 822.T細胞、K422細胞

BT-483細胞類似產(chǎn)品：：C8161細胞、JIII細胞、M109細胞

NCI-SNU-601細胞類似產(chǎn)品：：Human fetal lung fibroblast 1細胞、SNU-1細胞、SK-MEL3細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

CAL-148 Cell|人乳腺癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

LIM1215細胞類似產(chǎn)品：：HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞

SCC15細胞類似產(chǎn)品：：H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞

Vero 76細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞

4T1-A細胞類似產(chǎn)品：：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

LIM1215細胞類似產(chǎn)品：：HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞

SCC15細胞類似產(chǎn)品：：H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞

Vero 76細胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞

4T1-A細胞類似產(chǎn)品：：KU-812細胞、IMR 90細胞、OVCA5細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細胞的污染。細菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L。這些污染比較容易觀察到，它們往往會使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因為病毒顆粒別微小，一般的實驗室都沒能力檢查細胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細胞內(nèi)，對整個細胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會使研究人員長期得到受病毒影響的細胞的實驗結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細胞壁，在細胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時對常用于細胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會影響實驗的結(jié)果。培養(yǎng)多種細胞時操作不當，會導致細胞的交叉污染。由于不同細胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長速率快的細胞終會完全取代被污染的細胞。

JiyoyeP-2003細胞類似產(chǎn)品：：UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞

MNNGHOS細胞類似產(chǎn)品：：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞

M-G63細胞類似產(chǎn)品：：SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞

VK-2/E6E7細胞類似產(chǎn)品：：HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞

PC-3M-2B4細胞類似產(chǎn)品：：GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞

OK-WT細胞類似產(chǎn)品：：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞

hTERT-RPE細胞類似產(chǎn)品：：NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞

LA-N-6(OAN)細胞類似產(chǎn)品：：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞

H1688細胞類似產(chǎn)品：：T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞

Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞類似產(chǎn)品：：SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞

CAL-148 Cell|人乳腺癌細胞

NBLS細胞類似產(chǎn)品：：CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞

H-2029細胞類似產(chǎn)品：：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞

SKGIIIA細胞類似產(chǎn)品：：Strain L-929細胞、MDAMB415細胞、H1672細胞

SKNBE-1細胞類似產(chǎn)品：：SKOV-433細胞、BC3H-1細胞、JS1細胞

HEM-L細胞類似產(chǎn)品：：Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞

Tu 212細胞類似產(chǎn)品：：H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞

Tu 212細胞類似產(chǎn)品：：H-187細胞、769P細胞、ssMCF7細胞

Daudi細胞類似產(chǎn)品：：SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞

KMY1022細胞類似產(chǎn)品：：OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞

NB-9細胞類似產(chǎn)品：：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞

P116細胞類似產(chǎn)品：：MH-22a細胞、DMS 114細胞、CHP 126細胞

A-673細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞

HKBML細胞類似產(chǎn)品：：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞

Hs852細胞類似產(chǎn)品：：FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞

FRO81-2細胞類似產(chǎn)品：：RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞

Mel624細胞類似產(chǎn)品：：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞

P3X63Ag8-6-5-3細胞類似產(chǎn)品：：SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞

MDAMB-231細胞類似產(chǎn)品：：KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞

Calf Pulmonary Artery 47細胞類似產(chǎn)品：：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞

KYSE 510細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞

FRTL 5細胞類似產(chǎn)品：：RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞

HRIF細胞類似產(chǎn)品：：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞

D283-MED細胞類似產(chǎn)品：：MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞

D283-MED細胞類似產(chǎn)品：：MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞

SW839細胞類似產(chǎn)品：：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞

SNU387細胞類似產(chǎn)品：：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞

32D:cl3細胞類似產(chǎn)品：：Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞

LIM1215細胞類似產(chǎn)品：：HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞

CCLP1細胞類似產(chǎn)品：：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞

CAL-148 Cell|人乳腺癌細胞

3T3細胞類似產(chǎn)品：：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞

UWB1-289細胞類似產(chǎn)品：：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞

Rat1細胞類似產(chǎn)品：：INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞

SK Mel28細胞類似產(chǎn)品：：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞

ARO-81細胞類似產(chǎn)品：：CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞

HUCCT1細胞類似產(chǎn)品：：Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞

CL40細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞

VE細胞類似產(chǎn)品：：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞

Mv.1.Lu細胞類似產(chǎn)品：：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞

MDA-MB157細胞類似產(chǎn)品：：hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞

L363細胞類似產(chǎn)品：：alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞

H1792細胞類似產(chǎn)品：：IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞

U 138 MG細胞類似產(chǎn)品：：A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞

MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞類似產(chǎn)品：：LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞

CPAE細胞類似產(chǎn)品：：OSRC2細胞、LS411細胞、SW48細胞

MC3T3-E1 Subclone 14細胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞

MDA-MB-468細胞類似產(chǎn)品：：V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞

"