"NSC-34 Cell|鼠神經(jīng)元細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：神經(jīng)元

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長：貼壁

UK Pan-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞

SUM-102細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1651細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞

OVCAR-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IAR20細(xì)胞、H446細(xì)胞、A253細(xì)胞

NCI-H322T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rh30細(xì)胞、3AO細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞

B16-F10-BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA1386細(xì)胞、HITT15細(xì)胞、G519細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NSC-34 Cell|鼠神經(jīng)元細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。

Lu-165細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞

NIH 3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞

B5537SKIN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLTC-1細(xì)胞、HT 29細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞

HUV-EC-C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

Lu-165細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞

NIH 3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞

B5537SKIN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLTC-1細(xì)胞、HT 29細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞

HUV-EC-C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

Ect1/E6E7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH-3T3-L1細(xì)胞、H-676B細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞

16-HBEo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞

VMM-5A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞

UMRC-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RBL細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞

HEK 293A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞

NCIH929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-251MG細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞

H.Ep.-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-886細(xì)胞、PLA802細(xì)胞、BT-B細(xì)胞

Caco-2BBe細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 954細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞

SW-954細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞

DU 4475細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞

NSC-34 Cell|鼠神經(jīng)元細(xì)胞

SHG44細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293S細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞、T24(ECV304)細(xì)胞

NCI-H1693細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞

Hepa1-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dx5細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞、SAS細(xì)胞

Y 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MESSA/Dx5細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞

C41細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞

K-1735細(xì)胞類似產(chǎn)品：：786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞

MC3T3-E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞

NTERA-2cl.D1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DHBE細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞

Earle's L cells細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MGECs細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞、JHH7細(xì)胞

RPMI-1846細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞

Douglas Foster-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞

SHG 44細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HD-LM-2細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞

CCD-18Co細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TW 01細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞

SV40-MES13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞

MX-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFE-145細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、N-2a細(xì)胞

NCI-H187細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞

NR-8383細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU4細(xì)胞、NK92細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞

E.L.4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL9217細(xì)胞、HEL299細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞

JC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞

VSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞

A-20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EFM192A細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞、SN4741細(xì)胞

NCIH1963細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C1498細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞、ES2細(xì)胞

Tca-8113細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM12細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞、NP-69細(xì)胞

SF-539 BT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCL1細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞、RMC細(xì)胞

HCC941122細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1963細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、H-1793細(xì)胞

HEC251細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL1-0細(xì)胞、IHH4細(xì)胞、MDA453細(xì)胞

HONE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、TR-146細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞

SK-N-BE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ROS 17/2.8細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞

SKLU01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM 239細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞

NSC-34 Cell|鼠神經(jīng)元細(xì)胞

MTEC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1833細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞、HS-294細(xì)胞

COR-L26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EJ 138細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞、JB-6細(xì)胞

aNK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA8細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞

hEM15A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞

Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞

PC-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞

JVM2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞

Hs 832(C).T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞

A2780-CP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 578.T細(xì)胞、NG10815細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞

HCC1187細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARIP細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞、MM6細(xì)胞

HLE B-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Ly1細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞

Tregs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Epstein-Barr-3細(xì)胞、SCC9細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞

CAL-62細(xì)胞類似產(chǎn)品：：mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞

NK-92.05細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D-Cl3細(xì)胞、H1573細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞

DR2R 1610細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GNM細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞

KU.812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞

BV2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 520細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞

"