"Tb 1 Lu Cell|蝙蝠肺細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：肺

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

U-343細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3HR1-BL細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞、786-0細(xì)胞

D283細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMEL3細(xì)胞、M-1細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞

Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H211細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞

HOCF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Psi2-DAP細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、F-36P細(xì)胞

DMS 79細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-358細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、HemECs細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Tb 1 Lu Cell|蝙蝠肺細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。

MC-CAR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞

Colon26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ABE-8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞

J111細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞

SNK-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

MC-CAR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞

Colon26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ABE-8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞

J111細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞

SNK-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L(zhǎng)。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長(zhǎng)期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國(guó)培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長(zhǎng)速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

rRTEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞

CCRFCEM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞

OACP4 C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1581細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞

H1618細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞

NCI-HUT-596細(xì)胞類似產(chǎn)品：：675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞

KRC-Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞

HBL-100細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS-I/1細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞、Hs27細(xì)胞

MMQ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞

NCI H295R細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1092細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞

OVCAR 433細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO394細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞

Tb 1 Lu Cell|蝙蝠肺細(xì)胞

MOVAS-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞

Be Wo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB330細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞

Duke University 145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞

MHH-CALL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HIEC細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞

HOK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T98 G細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞、SW962細(xì)胞

Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WPMY-1細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞

Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WPMY-1細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞

T2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞

JOSK-M細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNO-1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞、HcaF細(xì)胞

X63Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞

BPH1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞

Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：0V-1063細(xì)胞、DU_145細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞

UMUC3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞

Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞

Hs675細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞

LC1/Sq細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 822.T細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞

NCI-N87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞

KYSE 410細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ZR7530細(xì)胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、786.O細(xì)胞

NCIH211細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞

DHL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞

NCIH661細(xì)胞類似產(chǎn)品：：YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞

NRK49F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞

Farage細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NRK clone 52E細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞、H-1522細(xì)胞

130 T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2106細(xì)胞、3396細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞

IR983F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞

Lung cancer-1/squamous細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UM-UC-3細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞、H220細(xì)胞

MDA-MB361細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS-53細(xì)胞、LA4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞

CAL 78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞

U-251細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 606細(xì)胞、293E細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞

Tb 1 Lu Cell|蝙蝠肺細(xì)胞

HCC0044細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-4 I細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞、VERO76細(xì)胞

Daudi細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 837細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞

M210B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞

H1703細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞

MESSADX5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞

Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞

NCIH1436細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞

BIC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞

BIC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞

SW480細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAEpiC細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞、TK-1細(xì)胞

CAL 85-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞

hTERT-HME1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-673細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞、NL-20細(xì)胞

SW 626細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC-1/sq細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、159 PT細(xì)胞

Vero 76細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞

HEC251細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL1-0細(xì)胞、IHH4細(xì)胞、MDA453細(xì)胞

RPMI-8402細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuperTube細(xì)胞、ABE-8.1/2細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞

HEC-1-B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QBC939細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞、KP-4細(xì)胞

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