"OP9 Cell|小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：骨髓基質(zhì)；C５７BL/６ x C３H

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。

細(xì)胞生長：貼壁

Hs746-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DU 4475細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞、KY-270細(xì)胞

University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM2132細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞

Sup T-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞

H766T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs27細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞、HSF2細(xì)胞

MDAMB134VI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BSC1細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞、Lec1細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

OP9 Cell|小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

LTEP-sm細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞

CCD-33Co細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞

V-79細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞

SUNE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM06141B細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

LTEP-sm細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞

CCD-33Co細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞

V-79細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞

SUNE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM06141B細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

NK92細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞

RIN14B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞

HCC 38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞

AU-Mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RKO-AS45-1細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞

MCF.10A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞

K562/ADR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LCMS細(xì)胞、PG-4細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞

NTHY-ORI3.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：hEEC細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞

C4-2B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞

Panc813細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero-E6細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞

SK-N-SH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞、STC-1細(xì)胞

OP9 Cell|小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞

H-508細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞

MIA-PaCa-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞

VP229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-1222細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞

LN-229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RGCs細(xì)胞、786-0細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞

BC-027細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞

MT2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞

MT2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞

MHH-CALL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞

Hep2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞

C666-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AM細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞

Jiyoye細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞

Ramos細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL51細(xì)胞、PC-9細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞

HEC-1B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞

NCIH1435細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHG-5細(xì)胞、293-GP細(xì)胞、JIII細(xì)胞

HCC2935細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞

SUM-52細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AG 9細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞

H-1650細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞

Caco-2BBe細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 954細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞

2PK3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH 3T6細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞

P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SIRC細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞、H-2122細(xì)胞

2E8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT 8細(xì)胞、U-87細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞

Hs870T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JG細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞

Lu-165細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞

GM2131細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞

HPAF-II細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Reh細(xì)胞、DMS114細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞

A704細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞

MDA 435細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SP2細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、T47D細(xì)胞

NCI-H157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞

HCC44細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞

OP9 Cell|小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞

H209細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HN6細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞

MDA436細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMR106細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞

Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞

VMRC-LCD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞

NCI-H-295細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞

GC-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 4細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞

Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PG-4細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞、RCC4細(xì)胞

TE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OC316細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞

NCIH2073細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞

P388細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞

BEAS2B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JOSK-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞

NR8383.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH520細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞、A2058細(xì)胞

H-446細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞

HT-144細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMC-1細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、Line 522細(xì)胞

TF-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Chang liver細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞

A2058細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-480細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞、A7r5細(xì)胞

18G3.cl 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞

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