"Super Tube Cell|狗腎細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞接收操作說明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(Zui主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細(xì)胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會(huì)長得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

細(xì)胞生長：貼壁

HuH28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞

639V細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs695T細(xì)胞、201T細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞

LS 180細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT-1080細(xì)胞、L 929細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞

IPLB-Sf21AE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H378細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞

HT1080細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI747細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

Super Tube Cell|狗腎細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

alphaTC clone 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞

S180細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞

M619細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞

HMO6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NG 108-15細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞、H-378細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

alphaTC clone 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞

S180細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞

M619細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞

HMO6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NG 108-15細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞、H-378細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

SW 1088細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTera2/D1細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞

HCC1143細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、NL-20細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞

THC-8307細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞

RBL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MMAc.SF細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞、H747細(xì)胞

MeT-5A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞

293T/17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-16細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞、H1693細(xì)胞

293-EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞

SKRC20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞

MDA MB 436細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞

BAC1.2F5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞

Super Tube Cell|狗腎細(xì)胞

LNCaP C4-2B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EB1細(xì)胞、HCE細(xì)胞、MAD109細(xì)胞

GM02132細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞

SCC4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 201細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞

MDA-MB-175-VII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-1463細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞、NB.4細(xì)胞

Malme-3M細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞

C3H10T1/2CL8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNFI細(xì)胞、TE-15細(xì)胞、H-2073細(xì)胞

C3H10T1/2CL8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNFI細(xì)胞、TE-15細(xì)胞、H-2073細(xì)胞

JEG3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞

Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞

HFTF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞

MDA-453細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JCA1細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞

SW1222細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞

LS-411N細(xì)胞類似產(chǎn)品：：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞

SK-N-AS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FDCP-1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞、CCRF細(xì)胞

CV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞

ATDC-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMST-6細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞

KU-812F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：E304細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞

Anip 973細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞

OE19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞

TO 175.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞

H-1581細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H841細(xì)胞、HLE細(xì)胞、YH細(xì)胞

HS578T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-468細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞

H 9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞

EOC20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞

DMS-273細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs840_T細(xì)胞、2780細(xì)胞、201T細(xì)胞

BNCL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞

NCI-747細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、CHG5細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞

HONE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞

WM35細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-172細(xì)胞、293F細(xì)胞、H-2286細(xì)胞

Super Tube Cell|狗腎細(xì)胞

HEK-293-H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LK-2細(xì)胞、Reh細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞

A-549細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞

HHL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞

3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞

GL-261細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞

RPTEC/TERT1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PTK-2細(xì)胞、H1819細(xì)胞、NT2細(xì)胞

BXPC3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞

LS 1034細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、LY細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞

SUD-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHOK1細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞

IOSE-80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞

NIH-3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞

HO-8910PM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞

HeLa/S3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞

HAPI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARO細(xì)胞、H1944細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞

HuT78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3J HR1-K細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞

SK-RC-20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CT 26細(xì)胞、L 1210細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞

HeLa229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RT-BM-1細(xì)胞、CA-46細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞

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