"KGN Cell|人卵巢顆粒細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞株是顆粒細(xì)胞瘤。細(xì)胞在加入人體絨膜促性腺激素后可能產(chǎn)生孕酮。細(xì)胞生長緩慢。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，Zui后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

細(xì)胞生長：貼壁

MEF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OKAC1細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞

Lewis lung carcinoma細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Duck embryo細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞

HEK293T/17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNSH細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞

Farage Original Line細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE-Van細(xì)胞、LMH細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞

HLF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Cates 1B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、SW 839細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KGN Cell|人卵巢顆粒細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Natural Killer-92細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞

HeLa-S3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞、SW 579細(xì)胞

SUDHL-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-10 Attached細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞

Swiss 3T6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM02219D細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、KM-12細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

Natural Killer-92細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞

HeLa-S3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞、SW 579細(xì)胞

SUDHL-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-10 Attached細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞

Swiss 3T6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM02219D細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、KM-12細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

Rainbow Trout Embryo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞

C-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MRC9細(xì)胞、JIMT細(xì)胞、GM-637細(xì)胞

TF1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB1-RGB細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞

NPC-TW 01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞

16HBEo-細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH3255細(xì)胞、MH7A細(xì)胞、aNK細(xì)胞

WBF344細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1428細(xì)胞、TF-1細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞

Kelly細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞

H-647細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit225/K6細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞

Hs.27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-526細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞

RS4-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞

KGN Cell|人卵巢顆粒細(xì)胞

Hs888Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 829細(xì)胞、Y79細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞

NCIH847細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞

MKN-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞

AR41P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞

WM-2664細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mahlavu細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞

CHL-IU細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU-812-F細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞

CHL-IU細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU-812-F細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞

Tu686細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UCLA-RO 81細(xì)胞、SUM102細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞

NCI-H1385細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞

GM01232細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞

MHCC97-L細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞

GA-10 (Clone 4)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JM細(xì)胞、CEM細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞

BT474細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-727細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞、MS-751細(xì)胞

RC13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞

NCI-HUT-520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞

MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞

Hs 742.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：High5細(xì)胞、H-1435細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞

NCI.H460細(xì)胞類似產(chǎn)品：：THP-1(ATCC)細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞

NCIH1755細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞

NG-108-15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、CL11細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞

NCIH660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-14細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞、KAT5細(xì)胞

BBE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kupffer細(xì)胞、Y1細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞

LN-229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RGCs細(xì)胞、786-0細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞

MV-4-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞

MLE12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞

A375.S2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS-153細(xì)胞、NH6細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞

Human podocyte細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L(TK-)細(xì)胞、ECC12細(xì)胞、Daoy細(xì)胞

HMy2.CIR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3X63 Ag8.653細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、MC-38細(xì)胞

OCI-LY-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞

KGN Cell|人卵巢顆粒細(xì)胞

SNU182細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞

L cells (TK-)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Karpas 422細(xì)胞、H1882細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞

NCI-H1417細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KTCTL-140細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞、HuT78細(xì)胞

AC29細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEC-1-B細(xì)胞、H8細(xì)胞、GM3190細(xì)胞

RC-K8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293-FT細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞、KLN205細(xì)胞

NKL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞

OCI-Ly 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE8細(xì)胞、RGCs細(xì)胞、A549 ATCC細(xì)胞

BNCL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞

U343細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞

P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2444細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、LC1細(xì)胞

H-1915細(xì)胞類似產(chǎn)品：：S180細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞

SU-DH-L5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC 61細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞、EBTr細(xì)胞

CACO2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PCI:SG231細(xì)胞、HFB細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞

Glioma-261細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞

ML-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAMA細(xì)胞、H2452細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞

HRC-99細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CW-2細(xì)胞、HA1800細(xì)胞、MO59J細(xì)胞

MGC-803細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NMC-G1細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞

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