"MC116:人(未分化的)淋巴瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：懸浮

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

TCMK1細胞類似產(chǎn)品：：CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞

HT1376細胞類似產(chǎn)品：：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞

RAW264細胞類似產(chǎn)品：：TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞

OSRC2細胞類似產(chǎn)品：：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

MC116:人(未分化的)淋巴瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

H1299細胞類似產(chǎn)品：：C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞

BJA-B-1細胞類似產(chǎn)品：：GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞

SO-Rb 50細胞類似產(chǎn)品：：293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞

細胞培養(yǎng)方面注意的幾點：無菌意識要強：實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升GAO到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。

細胞傳代方法：每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：懸浮生長 

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復(fù)吹打。

Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞類似產(chǎn)品：：LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞

ACHN細胞類似產(chǎn)品：：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞

HSC-2細胞類似產(chǎn)品：：Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞

TE671/RD細胞類似產(chǎn)品：：WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞

NCIH1666細胞類似產(chǎn)品：：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞

M20 [Human melanoma]細胞類似產(chǎn)品：：WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞

B-95-8細胞類似產(chǎn)品：：L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞

3T3-J2細胞類似產(chǎn)品：：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞

HBL1細胞類似產(chǎn)品：：U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞

LL/2細胞類似產(chǎn)品：：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞

SK-BR-3細胞類似產(chǎn)品：：KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞

Hepa1-6細胞類似產(chǎn)品：：Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞

SCC-4細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞

Ramos-2G6-4C10細胞類似產(chǎn)品：：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞

P30 OHK細胞類似產(chǎn)品：：Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞

SW 1417細胞類似產(chǎn)品：：OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞

L-363細胞類似產(chǎn)品：：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞

H-650細胞類似產(chǎn)品：：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞

32D.3細胞類似產(chǎn)品：：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞

Melan-a細胞類似產(chǎn)品：：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞

Ramos-2G6-4C10細胞類似產(chǎn)品：：BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞

C32r細胞類似產(chǎn)品：：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞

PL11細胞類似產(chǎn)品：：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞

Porcine Kidney-13細胞類似產(chǎn)品：：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞

MC116:人(未分化的)淋巴瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Wien 133細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞

OSC19細胞類似產(chǎn)品：：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞

RBMVEC細胞類似產(chǎn)品：：DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞

HEC-1-B細胞類似產(chǎn)品：：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞

MDA-MB-157細胞類似產(chǎn)品：：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞

SW-1990細胞類似產(chǎn)品：：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞

Pfeiffer細胞類似產(chǎn)品：：L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞

CCRF/CEM/0細胞類似產(chǎn)品：：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞

MDA MB 231細胞類似產(chǎn)品：：L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞

RS4-11細胞類似產(chǎn)品：：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞

CEM-C1細胞類似產(chǎn)品：：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞

D-324MED細胞類似產(chǎn)品：：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞

WC00044細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞

H-157細胞類似產(chǎn)品：：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞

C3H 10T1/2細胞類似產(chǎn)品：：CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞

M210B4細胞類似產(chǎn)品：：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞

Hs870T細胞類似產(chǎn)品：：JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞

SMMC-7721細胞類似產(chǎn)品：：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞

J-774細胞類似產(chǎn)品：：IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞

LTEP-sm 1細胞類似產(chǎn)品：：Mono-Mac-6細胞、UPCI-SCC-090細胞、SNU-475細胞

DMS-153細胞類似產(chǎn)品：：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞

DMS-153細胞類似產(chǎn)品：：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞

H-1238細胞類似產(chǎn)品：：ARH77細胞、Anip[973]細胞、THLE-3細胞

HEC-251細胞類似產(chǎn)品：：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞

GM02132C細胞類似產(chǎn)品：：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞

IOSE-Mar細胞類似產(chǎn)品：：4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞

CAOV4細胞類似產(chǎn)品：：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞

WM-266-4細胞類似產(chǎn)品：：CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞

Leukemia L1210細胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞

H-2029細胞類似產(chǎn)品：：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞

NCI-H1693細胞類似產(chǎn)品：：MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞

MDA-MB-175-VII細胞類似產(chǎn)品：：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞

SW.620細胞類似產(chǎn)品：：GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞

GAK細胞類似產(chǎn)品：：RSC-364細胞、C-28I2細胞、SVEC4-10細胞

SuDHL 10細胞類似產(chǎn)品：：Madin-Darby Canine Kidney細胞、MC-116細胞、DMS153細胞

MDA157細胞類似產(chǎn)品：：Mink Lung細胞、RBL 1細胞、OE-33細胞

HSC1細胞類似產(chǎn)品：：PC 61 5.3細胞、KG1細胞、OE-21細胞

PK(15)細胞類似產(chǎn)品：：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞

ECC12細胞類似產(chǎn)品：：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞

PaCa2細胞類似產(chǎn)品：：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞

MM6細胞類似產(chǎn)品：：Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞

CHO-K1細胞類似產(chǎn)品：：V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞

MGH-U1細胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML2細胞、IM-9細胞、GM02219C細胞

SW1417細胞類似產(chǎn)品：：B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞

SUDHL-16細胞類似產(chǎn)品：：F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞

Panc-3_27細胞類似產(chǎn)品：：WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞

Becker細胞類似產(chǎn)品：：WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞

KP-N-RT細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞

T/GHA-VSMC細胞類似產(chǎn)品：：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞

U937細胞類似產(chǎn)品：：Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞

LICCF細胞類似產(chǎn)品：：Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞

UO-31細胞類似產(chǎn)品：：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞

A-10細胞類似產(chǎn)品：：Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞

Hce8693細胞類似產(chǎn)品：：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞

HaCaT細胞類似產(chǎn)品：：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞

HUT-28細胞類似產(chǎn)品：：P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞

RDES-1細胞類似產(chǎn)品：：HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞

RDES-1細胞類似產(chǎn)品：：HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞

HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞類似產(chǎn)品：：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞

SiHa細胞類似產(chǎn)品：：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞

SKCol1細胞類似產(chǎn)品：：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞

SW 1116細胞類似產(chǎn)品：：WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞

COLO 16細胞類似產(chǎn)品：：EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞

MeT-5A細胞類似產(chǎn)品：：A-549細胞、SK-ES1細胞、PANC 327細胞

TE 85 ClF-5細胞類似產(chǎn)品：：IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞

MDA134細胞類似產(chǎn)品：：RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞

NCIH520細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞

H9c2 (2-1)細胞類似產(chǎn)品：：HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞

Hep 3B2.1-7細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞

JurkatE6-1細胞類似產(chǎn)品：：Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞

Epstein-Barr-2細胞類似產(chǎn)品：：HK2細胞、MLTC-1細胞、SKMES細胞

Capan2細胞類似產(chǎn)品：：H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞

Walker/LLC-WRC 256細胞類似產(chǎn)品：：GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞

PANC0203細胞類似產(chǎn)品：：SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞

OCI Ly10細胞類似產(chǎn)品：：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞

NOMO1細胞類似產(chǎn)品：：Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞

MDA-MB-435 S細胞類似產(chǎn)品：：MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞

SUM 52細胞類似產(chǎn)品：：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞

Ra No. 1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞

JHH-7細胞類似產(chǎn)品：：GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞

RPMI 6666細胞類似產(chǎn)品：：TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞

MC116:人(未分化的)淋巴瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

SNU520細胞類似產(chǎn)品：：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞

CBRH7919細胞類似產(chǎn)品：：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞

Nb2細胞類似產(chǎn)品：：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞

SKNEP細胞類似產(chǎn)品：：U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞

190PT細胞類似產(chǎn)品：：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞

IPLB-SF 21AE細胞類似產(chǎn)品：：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞

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