"AAV-293 Cell|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：我們推薦使用AAV-２９３細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-２９３源自普遍使用的 HEK２９３細(xì)胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK２９３細(xì)胞是剪切過的腺病毒５型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞。 跟HEK２９３細(xì)胞一樣，AAV-２９３細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E１基因，當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個(gè)AAV助質(zhì)粒(一個(gè)含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC, 和E１缺失助質(zhì)粒)時(shí)，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞接收操作說明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(Zui主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用，如細(xì)胞密度GAO于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝HAO備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，ZuiHAO不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

HSC-T6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞

PLC PRF 5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RLE-6TN細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞

HT3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FDC-P1細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞

RSC-364細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H-128細(xì)胞、CV-1細(xì)胞、F442-A細(xì)胞

0V-1063細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

AAV-293 Cell|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

32D.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞

Melan-a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞

Ramos-2G6-4C10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞

C32r細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

32D.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞

Melan-a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞

Ramos-2G6-4C10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞

C32r細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L(zhǎng)。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長(zhǎng)期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國(guó)培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長(zhǎng)速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LIM 1215細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞、HuH28細(xì)胞

ACHN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞

HSC-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞

TE671/RD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WB-F344細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞、SNU739細(xì)胞

NCIH1666細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDCK (NBL-2)細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞

M20 [Human melanoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM115細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞

B-95-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-cell細(xì)胞、CAMA細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞

3T3-J2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、C-127細(xì)胞、VK2細(xì)胞

HBL1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U2-OS細(xì)胞、VSMC細(xì)胞、D324細(xì)胞

LL/2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞

AAV-293 Cell|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞

SK-BR-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMS11細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞

Hepa1-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dx5細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞、SAS細(xì)胞

SCC-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1048細(xì)胞、TE7細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞

Ramos-2G6-4C10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞

P30 OHK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ly1細(xì)胞、M-1細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞

SW 1417細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞

L-363細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2342細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞

H-650細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞

PL11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHK細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、PF-382細(xì)胞

Porcine Kidney-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1048細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞

Wien 133細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1404細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、MNNG細(xì)胞

TCMK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CMT.64細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞、H-23細(xì)胞

HT1376細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞

RAW264細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TYK-nu細(xì)胞、CD18細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞

OSRC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GL261細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞

H1299細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-4-I細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、T8細(xì)胞

BJA-B-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GES1細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞

SO-Rb 50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293/EBNA細(xì)胞、H-1385細(xì)胞、RASMC細(xì)胞

PK(15)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW403細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞、BGC823細(xì)胞

ECC12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK-EBNA細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞

PaCa2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTera-2D1細(xì)胞、118MG細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞

MM6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit225細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞、C3A細(xì)胞

OSC19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BL-6細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞

RBMVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DoTc2 4510細(xì)胞、G401細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞

HEC-1-B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QBC939細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞、KP-4細(xì)胞

MDA-MB-157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞

SW-1990細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞

Pfeiffer細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-Wnt-3A細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞

CCRF/CEM/0細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞

AAV-293 Cell|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞

MDA MB 231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞

RS4-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞

CEM-C1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Reuber H35細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞

D-324MED細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞

WC00044細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK 293 EBNA細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞

H-157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞

C3H 10T1/2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CA 46細(xì)胞、H2126細(xì)胞、HCC44細(xì)胞

DMS-153細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2052_MM細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞、BJAB細(xì)胞

DMS-153細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2052_MM細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞、BJAB細(xì)胞

H-1238細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARH77細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞、THLE-3細(xì)胞

HEC-251細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞

GM02132C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞

IOSE-Mar細(xì)胞類似產(chǎn)品：：4T1-A細(xì)胞、GM02132細(xì)胞、SEG1細(xì)胞

CAOV4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G-292, clone A141B1細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞

WM-266-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD-966SK細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞

Leukemia L1210細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞、HCGC細(xì)胞

H-2029細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞

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