"PA-1 Cell|人卵巢畸胎瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

SCC 4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞

High-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH446細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、C4 I細(xì)胞

E304細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SR-786細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞

TE-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GOS-3細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞、LN299細(xì)胞

NCIH510細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NOMO1細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

PA-1 Cell|人卵巢畸胎瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，并開啟超凈臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開始實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái)，以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時(shí)小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺(tái)過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。

MESSA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞

MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞

UC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCFB（HCF）細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞

MC-116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：４-１：１０傳代；每周２-３次?！?/p>

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

MESSA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞

MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞

UC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCFB（HCF）細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞

MC-116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

FU-OV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH526細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞

McA-RH8994細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞

H35細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV 2008細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞

LS-180細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO678細(xì)胞、ABC1細(xì)胞、K1735細(xì)胞

SaOS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EA.Hy926細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞

WEHI231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LICR-HN6細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞

H-322細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LOU-NH91細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞、KLM1細(xì)胞

MLO-Y4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HELF細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞

293T/17細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL-16細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞、H1693細(xì)胞

NOK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞

PA-1 Cell|人卵巢畸胎瘤細(xì)胞

R1800[RA]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞

H8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞

LC1sq細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞

BT325細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY細(xì)胞、J82細(xì)胞、HuH7細(xì)胞

AML-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly7細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞

Leydig細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞

Leydig細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞

SLMT1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L 428細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞

Institute for Medical Research-32細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-415細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞、COLO357細(xì)胞

NBL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞

LS 174 T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WILL2細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞、MPP89細(xì)胞

LX-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-435S細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞、GM04678細(xì)胞

NCIH2106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞

CNE2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WEHI 3細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞、ECV細(xì)胞

Farage OL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞

SJSA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PECAPJ34細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞

HF-91細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞

JEKO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞

LUDLU 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC9204細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞

Mino細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞

KYSE-520細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞

P3-X63-Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IMR 32細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞

SF126細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMH-2細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞

SUM-149PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞

Hepa 1-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞

KRC-Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞

PA I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM00637H細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞、EU-2細(xì)胞

CCD1112Sk細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB1RGB細(xì)胞、BL6細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞

SKO-007細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1833細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞、HKBML細(xì)胞

PA-1 Cell|人卵巢畸胎瘤細(xì)胞

NIH-OVCAR-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：251 MG細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞、High-5細(xì)胞

OCI-Ly 7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H220細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞

C-32細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EST81細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞

CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/ADR細(xì)胞、U937細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞

GP-293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mo7e細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞、LCMS細(xì)胞

CT-26 WT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Line 697細(xì)胞、CAL33細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞

RM-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞

SU86_86細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFL-I細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞

LM2-4175細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞、T-98G細(xì)胞

SVG p12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1688細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞、CAL78細(xì)胞

Kit 225-K6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3-F442A細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞

CCRF-CEM/S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞

TE-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞

Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-7721細(xì)胞、H-774細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞

SJSA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PECAPJ34細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞

NCIH378細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO320-DM細(xì)胞、COS-7細(xì)胞、EC9706細(xì)胞

EO771細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH841細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞

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