"KLE Cell|人子宮內(nèi)膜癌細胞

細胞背景資料：該細胞源自６４歲子宮內(nèi)膜癌女性患者

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

養(yǎng)了幾年細胞，說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法：１)培養(yǎng)細胞前，可以看看細胞點說明書，包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細胞，就得細心呵護了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況；４)凍存細胞復(fù)蘇后第二天ZuiHAO更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細胞Zui大的教訓(xùn)：不能偷懶!細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。１)不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，別是當你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。

細胞生長：貼壁

NCI-H1793細胞類似產(chǎn)品：：Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞

NCI-441細胞類似產(chǎn)品：：SGC-996細胞、H-526細胞、Hs 888Lu細胞

Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞類似產(chǎn)品：：H128細胞、PANC-08-13細胞、MDAMB175細胞

GC-1spg細胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.2細胞、CNE1細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞

KMS-26細胞類似產(chǎn)品：：SUM149-PT細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、HPAF/CD18細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KLE Cell|人子宮內(nèi)膜癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Hs-343-T細胞類似產(chǎn)品：：FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞

RA-FLSs細胞類似產(chǎn)品：：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞

ID8/MOSEC細胞類似產(chǎn)品：：QGP1細胞、NCIN87細胞、ADR-RES細胞

PG-4細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞

細胞傳代方法：１：３傳代，３-４天換液一次

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

Hs-343-T細胞類似產(chǎn)品：：FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞

RA-FLSs細胞類似產(chǎn)品：：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞

ID8/MOSEC細胞類似產(chǎn)品：：QGP1細胞、NCIN87細胞、ADR-RES細胞

PG-4細胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞

細胞生長特性：貼壁生長

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

NCIH1563細胞類似產(chǎn)品：：GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞

32D CL3細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞

MCF7-CTRL細胞類似產(chǎn)品：：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞

RBL 1細胞類似產(chǎn)品：：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞

hFOB1.19細胞類似產(chǎn)品：：Helacyton gartleri細胞、IPLB-SF 21細胞、Ramos細胞

CTLA4Ig-24細胞類似產(chǎn)品：：HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞

SW-756細胞類似產(chǎn)品：：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞

HLE-SRA-01/04細胞類似產(chǎn)品：：Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞

MGc80-3細胞類似產(chǎn)品：：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞

R D細胞類似產(chǎn)品：：CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞

KLE Cell|人子宮內(nèi)膜癌細胞

HBMEC細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞

KATO 3細胞類似產(chǎn)品：：WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞

HLEB3細胞類似產(chǎn)品：：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞

SK RC 52細胞類似產(chǎn)品：：RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞

COR-L26細胞類似產(chǎn)品：：EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞

MESSA-DX5細胞類似產(chǎn)品：：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞

SW 962細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞

SUSM-1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞

Medical Research Council cell strain-5細胞類似產(chǎn)品：：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞

MSCs（mUCMSCs）細胞類似產(chǎn)品：：NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞

SW-756細胞類似產(chǎn)品：：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞

H1238細胞類似產(chǎn)品：：Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞

Mv 1 Lu (NBL-7)細胞類似產(chǎn)品：：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞

HCA-7細胞類似產(chǎn)品：：VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞

Douglas Foster-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞

RBL-1細胞類似產(chǎn)品：：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞

NCIH208細胞類似產(chǎn)品：：L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞

AM38細胞類似產(chǎn)品：：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞

CCLP-1細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞

MDA MB 134VI細胞類似產(chǎn)品：：KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞

SCC-25細胞類似產(chǎn)品：：ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞

RAW2647細胞類似產(chǎn)品：：P30/OHK細胞、0V-1063細胞、SNU520細胞

CORL88細胞類似產(chǎn)品：：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞

Caco-2/ATCC細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞

266 Bl細胞類似產(chǎn)品：：GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞

U-226AR1細胞類似產(chǎn)品：：H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞

C666-1細胞類似產(chǎn)品：：AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞

MDA-MB435細胞類似產(chǎn)品：：BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞

ML2細胞類似產(chǎn)品：：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞

KLE Cell|人子宮內(nèi)膜癌細胞

MOLP-8細胞類似產(chǎn)品：：Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞

MTC-TT細胞類似產(chǎn)品：：UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞

SK-N-BE(2C)細胞類似產(chǎn)品：：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞

MSC細胞類似產(chǎn)品：：CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞

OVCAR-8細胞類似產(chǎn)品：：578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞

hTERT-HME1細胞類似產(chǎn)品：：A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞

HME-1細胞類似產(chǎn)品：：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞

Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞類似產(chǎn)品：：NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞

IMCD3細胞類似產(chǎn)品：：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞

A431/P細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞

SW.620細胞類似產(chǎn)品：：GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞

RSMC細胞類似產(chǎn)品：：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞

H735細胞類似產(chǎn)品：：Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞

HCS2/8細胞類似產(chǎn)品：：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞

3T3細胞類似產(chǎn)品：：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞

NCI-H661細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞

H87細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞

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