"HEK293-FT Cell|表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)SV４０大T抗原，并且促進(jìn)最適病毒產(chǎn)物的產(chǎn)生。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細(xì)胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時間和方法。在冷凍時細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細(xì)胞生長：貼壁

MC-3T3-E1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NUGC-4細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞

WiDrTC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-251細(xì)胞、SNU387細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞

CCD841CoTr細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-72細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞

UK Pan-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPMEC細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞

A2780 CP70細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WPMY1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HEK293-FT Cell|表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯的，電擊對細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

H28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞

DMS273細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞

JB6 Cl 30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞

Lec1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

H28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞

DMS273細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞

JB6 Cl 30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞

Lec1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：懸浮生長

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

HELA-GFP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞

HEK-293F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞

H1184細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV-CA 432細(xì)胞、KCL22S細(xì)胞、YAC細(xì)胞

SV40 MES 13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DITNC1細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞

MA-782細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NKT細(xì)胞、AR41P細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞

KYSE 50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa S3細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞

NCI-A549細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M14-MEL細(xì)胞、AdHek細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞

H1355細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NBL-3細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞

N1E115細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ST-2細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞

MBT-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEY-A8細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞、EC109細(xì)胞

HEK293-FT Cell|表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞

Kupffer細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-729-T細(xì)胞、HN 4細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞

HEC-151細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HepG2-luc細(xì)胞、H358細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞

MDAMB453細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞

EA. hy 926細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM190PT細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞、AU 565細(xì)胞

RMG-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞

TOV-112細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞

TOV-112細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞

CAL39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞

rRMECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞

PC3M-1E8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEMx721.174.T2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞

U-138-MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-GT-2細(xì)胞、HNSC細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞

LS-513細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞

B16/F10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc_05_04細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞、HCC366細(xì)胞

H-358細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞

HA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOS/MNNG細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞

H1838細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DCS細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞

Ly18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞

CCRF.CEM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCIAML2細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞

PA317細(xì)胞類似產(chǎn)品：：R 2 C細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞、H3396細(xì)胞

L363細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞

SW 954細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞

BCAP37細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSCT6細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞、GM00637細(xì)胞

D283 Med細(xì)胞類似產(chǎn)品：：253JB-V細(xì)胞、L 428細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞

SNU-C1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞

HRGEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-18細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞

KY-270細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B78細(xì)胞、H1688細(xì)胞、COV362細(xì)胞

SK-N-BE-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ID8/MOSEC細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞

HTR8/SVneo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞

HEK293-FT Cell|表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞

L1210細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞

GM05887細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞

GM00637細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE0410細(xì)胞、H847細(xì)胞、CTSC-3細(xì)胞

AZ-521細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、T98-G細(xì)胞

OVCA433_Bast細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞

COR-L26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EJ 138細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞、JB-6細(xì)胞

Beta-TC-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-F細(xì)胞、2T細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞

H820細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHP-100細(xì)胞、PC 61細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞

BHK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TEC細(xì)胞、I90細(xì)胞、H2085細(xì)胞

16-HBE14o細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SN12-PM6細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞

CHOK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞

L1210細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞

E6-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞

B16-BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞

JM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MG-HU-3細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞

HCC-1419細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Adeno 293細(xì)胞、MCFs細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞

CCD-1095Sk細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC 9細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、HCO細(xì)胞

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