"BEAS-2B Cells(贈送Str鑒定報告)|人支氣管上皮細胞

細胞背景資料：從一位非癌個體的正常人支氣管上皮病理切片分離出上皮細胞。這些細胞用腺病毒１２-SV４０病毒雜交病毒感染并克隆。DEAS-２B細胞保留了對血清反應進行鱗關分化的能力，并有用于篩選誘導或影響分化及致癌的化學或生物制劑。細胞角蛋白及SV４０抗原染色陽性。

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。１)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。

細胞生長：貼壁

GM03320細胞類似產品：：SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞

P3HR-1細胞類似產品：：CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞

NCI-H1734細胞類似產品：：IEC-6細胞、SKO-007細胞、RPE1細胞

SF 539細胞類似產品：：SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞

H35 Reuber細胞類似產品：：CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞

BEAS-2B Cells(贈送Str鑒定報告)|人支氣管上皮細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

預防細胞污染的注意事項：實驗進行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風扇運轉10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內；實驗用品用完應移出超凈臺，以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞；即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤內加入無菌水（應每周更換），待培養(yǎng)箱內溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網。

細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內可長滿

C8161細胞類似產品：：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞

MN-60細胞類似產品：：Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞

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CEM-T4細胞類似產品：：MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞

NCI H929細胞類似產品：：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

BEAS-2B Cells(贈送Str鑒定報告)|人支氣管上皮細胞

細胞生長特性：貼壁生長

OsA-CL細胞類似產品：：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞

COLO 829細胞類似產品：：F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞

Mevo細胞類似產品：：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞

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NCCIT細胞類似產品：：L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞

M-1細胞類似產品：：HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間Zui長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請YOU先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做HAO照片記錄并聯(lián)系實驗室。

細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿HAO隔離衣，戴HAO口罩，帽子。４.風淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經火焰燒灼。８.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復工作臺面。

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