"JOSK-M Cell|人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：急性單核細(xì)胞白血病；男性

細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細(xì)胞生長：懸浮

NBL-S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞

293S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL-34細(xì)胞、H-2172細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞

ABC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-852-T細(xì)胞、BT483細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞

Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LPC-H12細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞

NCIH2591細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH345細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、HSMC細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

JOSK-M Cell|人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時(shí)會有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

DiFi細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL10細(xì)胞、MLM細(xì)胞、8305C細(xì)胞

HTR8/SVneo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞

H-810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKRC-42細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞、H 9細(xì)胞

COLO 741細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

DiFi細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL10細(xì)胞、MLM細(xì)胞、8305C細(xì)胞

HTR8/SVneo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞

H-810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKRC-42細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞、H 9細(xì)胞

COLO 741細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：懸浮

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

SJCRH30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SBC-3細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞、NCI660細(xì)胞

Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-810細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞、MB39細(xì)胞

SKMES細(xì)胞類似產(chǎn)品：：THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞

CAMA1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HL-7702細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞

D283-MED細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MBVP細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞

32D.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞

OCI-LY-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞

4T1.2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞

Calu-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE-140細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞、NCI-BL2141細(xì)胞

NBLAN5T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KFB細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞、CEK細(xì)胞

JOSK-M Cell|人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞

Hs 839.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞

P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OLN93細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞、H-740細(xì)胞

KYSE510細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Eph4 1424細(xì)胞、AE1201細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞

SW1353細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GP293細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞

HT 1080.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞

253J-Bladder-V細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA 4細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞、PAI細(xì)胞

253J-Bladder-V細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA 4細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞、PAI細(xì)胞

HNE-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KOPN-8細(xì)胞、CL1.0細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞

ACC-M細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF10-A細(xì)胞、NFS60細(xì)胞、HN13細(xì)胞

KLN205細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa S 3細(xì)胞、ES-2細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞

CEM-C7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL120細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞

NCIH1734細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-1細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞、SW-403細(xì)胞

BC-3-H-I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHP126細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞

K 562細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞、H-1568細(xì)胞

CCD-841-CoN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞

H1819細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞

TSUpr1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞

HSC6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOP 92細(xì)胞、Dami細(xì)胞、SNU620細(xì)胞

FBHE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞

H-865細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞

A-172細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK Mel 2細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞

HEK293FT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-87-MG細(xì)胞、251MG細(xì)胞、B16F10細(xì)胞

H2172細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alphaTC clone 6細(xì)胞、Med 341細(xì)胞、MKN74細(xì)胞

H2172細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alphaTC clone 6細(xì)胞、Med 341細(xì)胞、MKN74細(xì)胞

H1651細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞

Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞

LC-1Sq細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞

BEL7404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Detroit562細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞、SACC83細(xì)胞

COR-L23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF Pac1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞

JOSK-M Cell|人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞

ARO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞

RPE1-hTERT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞

GC1-SPG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SaOS-2細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞、H-1048細(xì)胞

32D.cl3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞、QBC939細(xì)胞

NCI-SNU-878細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞

LLCPK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-NMC細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞

AML-193細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU878細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞、Kelly細(xì)胞

EB-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞

MDA-1386細(xì)胞類似產(chǎn)品：：786-0細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞

hTERT-HME1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-673細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞、NL-20細(xì)胞

CCD19Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kasumi-1細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞、Kit-225細(xì)胞

COLO 699細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE671/RD細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞

AE1201細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 357細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞、MM1S細(xì)胞

Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NBL-12細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞、CAL27細(xì)胞

DMS 79細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SH-SY5Y Parental細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞、HN6細(xì)胞

EVSA/T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞

M-NFS-60細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ACC-2細(xì)胞、EOL1細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞

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