"KMY1022 Cell|EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞

細胞背景資料：B淋巴細胞；EBV轉(zhuǎn)化

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：懸浮

A375S2細胞類似產(chǎn)品：：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞

HANK1細胞類似產(chǎn)品：：MCA-38細胞、HMrSV5細胞、JIMT1細胞

H-1155細胞類似產(chǎn)品：：143BTK-細胞、NGP細胞、H250細胞

HCT116細胞類似產(chǎn)品：：Rat podocyte細胞、hTERT-RPE1細胞、HCT116細胞

Neukoplast細胞類似產(chǎn)品：：Murine Carcinoma-38細胞、ARPE-19細胞、A431/P細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KMY1022 Cell|EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

IHH-4細胞類似產(chǎn)品：：PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞

BNL 1MEA.7R.1細胞類似產(chǎn)品：：CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞

EU-2細胞類似產(chǎn)品：：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞

H-2106細胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-39細胞、SBC-5細胞、C4 I細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

IHH-4細胞類似產(chǎn)品：：PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞

BNL 1MEA.7R.1細胞類似產(chǎn)品：：CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞

EU-2細胞類似產(chǎn)品：：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞

H-2106細胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-39細胞、SBC-5細胞、C4 I細胞

細胞生長特性：懸浮

細胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細胞的污染。細菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L。這些污染比較容易觀察到，它們往往會使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因為病毒顆粒別微小，一般的實驗室都沒能力檢查細胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細胞內(nèi)，對整個細胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會使研究人員長期得到受病毒影響的細胞的實驗結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細胞壁，在細胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時對常用于細胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會影響實驗的結(jié)果。培養(yǎng)多種細胞時操作不當，會導(dǎo)致細胞的交叉污染。由于不同細胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長速率快的細胞終會完全取代被污染的細胞。

RCC10 RGB細胞類似產(chǎn)品：：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞

G-292細胞類似產(chǎn)品：：U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞

Clone Y1細胞類似產(chǎn)品：：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞

M210B4細胞類似產(chǎn)品：：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞

RD 2細胞類似產(chǎn)品：：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞

NCI-H1688細胞類似產(chǎn)品：：MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞

DITNC1細胞類似產(chǎn)品：：GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞類似產(chǎn)品：：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞

DF1細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞

COLO 738細胞類似產(chǎn)品：：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞

KMY1022 Cell|EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞

RMC-1細胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞

SW 480細胞類似產(chǎn)品：：Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞

SUP-M2細胞類似產(chǎn)品：：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞

Panc 05.04細胞類似產(chǎn)品：：KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞

HCC0202細胞類似產(chǎn)品：：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞

SW 1271細胞類似產(chǎn)品：：J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞

SW 1271細胞類似產(chǎn)品：：J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞

Cloudman M3細胞類似產(chǎn)品：：Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞

hUC-MSC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH378細胞、CHO-ori細胞、MXI細胞

NIT-1細胞類似產(chǎn)品：：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞

CemT4細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1937細胞、X63-Ag8細胞、GM2219C細胞

U-118-MG細胞類似產(chǎn)品：：KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞

AR4IP細胞類似產(chǎn)品：：D341 Med細胞、IEC 6細胞、SUDHL-16細胞

DV90細胞類似產(chǎn)品：：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞

Capan 1細胞類似產(chǎn)品：：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞

CCRF/CEM細胞類似產(chǎn)品：：M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞

HR-8348細胞類似產(chǎn)品：：MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞

T 24細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞

HCC-2279細胞類似產(chǎn)品：：HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞

BALB/c 3T3 clone A31細胞類似產(chǎn)品：：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞

NCI-H1373細胞類似產(chǎn)品：：HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞

MIN-6細胞類似產(chǎn)品：：SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞

HGMC細胞類似產(chǎn)品：：MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞

16HBE細胞類似產(chǎn)品：：MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞

MDA-415細胞類似產(chǎn)品：：HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞

MSCs（mUCMSCs）細胞類似產(chǎn)品：：NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞

UMR-106細胞類似產(chǎn)品：：NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞

N1E-115細胞類似產(chǎn)品：：87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞

YES 2細胞類似產(chǎn)品：：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞

KMY1022 Cell|EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞

hUC-MSC細胞類似產(chǎn)品：：NCIH378細胞、CHO-ori細胞、MXI細胞

H250細胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞

NMCG-1細胞類似產(chǎn)品：：GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞

Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞類似產(chǎn)品：：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞

MARC-145細胞類似產(chǎn)品：：MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞

BLO 11細胞類似產(chǎn)品：：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞

WB-F344細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞

TK.10細胞類似產(chǎn)品：：HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞

TK.10細胞類似產(chǎn)品：：HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞

KBM7細胞類似產(chǎn)品：：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞

DLD1細胞類似產(chǎn)品：：AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞

CEMC1細胞類似產(chǎn)品：：DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞

SF539細胞類似產(chǎn)品：：K562細胞、SJ-Rh 30細胞、3T3NIH細胞

IPLB-SF-21-AE細胞類似產(chǎn)品：：SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞

Colo16細胞類似產(chǎn)品：：HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞

COLO320-DM細胞類似產(chǎn)品：：HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞

PC 12細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞

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