"KMY1022 Cell|EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：B淋巴細(xì)胞；EBV轉(zhuǎn)化

細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮

A375S2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞

HANK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCA-38細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞

H-1155細(xì)胞類似產(chǎn)品：：143BTK-細(xì)胞、NGP細(xì)胞、H250細(xì)胞

HCT116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat podocyte細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、HCT116細(xì)胞

Neukoplast細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Murine Carcinoma-38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、A431/P細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KMY1022 Cell|EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

IHH-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞

BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHO K1細(xì)胞、SF17細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞

EU-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞

H-2106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

IHH-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞

BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHO K1細(xì)胞、SF17細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞

EU-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞

H-2106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、C4 I細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L(zhǎng)。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長(zhǎng)期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國(guó)培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長(zhǎng)速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

RCC10 RGB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1187細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞

G-292細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞

Clone Y1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞

M210B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞

RD 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SACCLM細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞

NCI-H1688細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLT3細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞

DITNC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GES-1細(xì)胞、LU165細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞

DF1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、H838細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞

COLO 738細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞

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RMC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB-I細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞、HuT102細(xì)胞

SW 480細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Balb/c 3T3細(xì)胞、CAL120細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞

SUP-M2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW1271細(xì)胞、D283MED細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞

Panc 05.04細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞

HCC0202細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞

SW 1271細(xì)胞類似產(chǎn)品：：J774 A1細(xì)胞、T-T細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞

SW 1271細(xì)胞類似產(chǎn)品：：J774 A1細(xì)胞、T-T細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞

Cloudman M3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞

hUC-MSC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞

NIT-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPA 87細(xì)胞、Co-115細(xì)胞、HCC202細(xì)胞

CemT4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1937細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞

U-118-MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP4細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞、NB-9細(xì)胞

AR4IP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞

DV90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞

Capan 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAOV3細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞

CCRF/CEM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞

HR-8348細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞

T 24細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB415細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞

HCC-2279細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAEC細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞、UO31細(xì)胞

BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞

NCI-H1373細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HLMVEC細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞

MIN-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC090細(xì)胞、DCS細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞

HGMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MFE 296細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞

16HBE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC38細(xì)胞、RASMC細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞

MDA-415細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞

MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞

UMR-106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NK 10a細(xì)胞、T8細(xì)胞、HOS-TE85細(xì)胞

N1E-115細(xì)胞類似產(chǎn)品：：87MG細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞、AML193細(xì)胞

YES 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞

KMY1022 Cell|EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞

hUC-MSC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞

H250細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞

NMCG-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM00215細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞

Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-810細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞、MB39細(xì)胞

MARC-145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞

BLO 11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞

WB-F344細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞

TK.10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa/DDP細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞、TOV112細(xì)胞

TK.10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa/DDP細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞、TOV112細(xì)胞

KBM7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3A細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞

DLD1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞

CEMC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞

SF539細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K562細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞

IPLB-SF-21-AE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMEL24細(xì)胞、SCC154細(xì)胞、JC細(xì)胞

Colo16細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBMEC細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞

COLO320-DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞

PC 12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI-2650細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞

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