周期素D1(抗原) 免疫途徑常用體內(nèi)免疫法包括皮下注射、腹腔或靜脈注射,也采用足墊、皮內(nèi)、滴鼻或點(diǎn)眼。最后一次加強(qiáng)免疫多采用腹腔或靜脈注射,目前尤其推崇后者,因?yàn)榭墒箍乖瓕?duì)脾細(xì)胞作用更迅速而充分。在最后一次加強(qiáng)免疫后第3天取脾融合為好,許多實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果表明,初次免疫和再次免疫應(yīng)答反應(yīng)中,取脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,特異性雜交瘤的形成高峰分別為第4天和第22天,在初次免疫應(yīng)答時(shí)獲得的雜交瘤主要分泌IgM抗體,再次免疫應(yīng)答時(shí)獲得的雜交瘤主要分泌IgG抗體。筆者體會(huì)陽(yáng)性雜交瘤出現(xiàn)的高峰與小鼠血清抗體的滴度并無(wú)明顯的平行關(guān)系,且多在血清抗體高峰之前。因此,為達(dá)到最高的雜交瘤形成率需要有盡可能多的漿母細(xì)胞,這在最后一次加強(qiáng)免疫后第3天取脾進(jìn)行融合較適宜。已有人報(bào)道采用脾內(nèi)免疫,可提高小鼠對(duì)抗原的免疫反應(yīng)性,且節(jié)省時(shí)間,一般免疫3天后即可融合。 單抗特性的鑒定⑴ 單克隆性的確定 包括雜交瘤細(xì)胞的染色體分析、單抗免疫球蛋白重鏈和輕鏈類(lèi)型的鑒定和單抗純度鑒定等。A、 雜交瘤細(xì)胞的染色體分析對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行染色體分析可獲得其是否是真正的雜交瘤細(xì)胞的客觀指標(biāo)之一,雜交瘤細(xì)胞的染色體數(shù)目應(yīng)接近兩種親本細(xì)胞染色體數(shù)目的總和,正常小鼠脾細(xì)胞的染色體數(shù)目為40,小鼠骨髓瘤細(xì)胞SP2/0為62-68,NS-1為54-64;同時(shí)骨髓瘤細(xì)胞的染色體結(jié)構(gòu)上反映兩種親本細(xì)胞的特點(diǎn),除多數(shù)為端著絲點(diǎn)染色體外,還出現(xiàn)少數(shù)標(biāo)志染色體。另一方面,雜交瘤細(xì)胞的染色體分析對(duì)了解雜交瘤分泌單抗的能力有一定的意義,一般來(lái)說(shuō),雜交瘤細(xì)胞染色體數(shù)目較多且較集中,其分泌能力則高,反之,其分泌單抗能力則低。 周期素D1(抗原)更多產(chǎn)品詳細(xì)信息請(qǐng)?jiān)L問(wèn)我公司主網(wǎng)站:www.shysbio.com QQ:3482524184
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