蛋白質(zhì)測定儀測定中鐵輕化加濃度對精度影響
流速的選擇化學發(fā)光流動注射體系中，流速太慢會導致發(fā)光信號出現(xiàn)在進入流通池之前；流速太快會導致發(fā)光信號出現(xiàn)在進入流通池之后，都不能被光電倍增管完全檢測。蛋白質(zhì)含量的測定可以使用蛋白質(zhì)測定儀進行快速的測定分析。
選擇載流、試樣的流速為5.0mL?min-1，魯米諾與鐵輕化加的流速為4.0mL?min-1。魯米諾濃度的選擇在卵清白蛋白-魯米諾-鐵輕化加和牛血清白蛋白-魯米諾-鐵輕化加兩體系中，當魯米諾的濃度在2.0×10-6~8.0×10-5mol?L-1范圍，隨著濃度的增加，兩體系的相對發(fā)光強度也增大，但當魯米諾濃度超過5.0×10-5mol?L-1時，相對發(fā)光強度均降低。魯米諾濃度為5.0×10-5mol?L-1時，峰形好，信噪比(S/N=3)。選擇魯米諾濃度為5.0×10-5mol?L-1。使用自動定氮儀分析發(fā)下鐵輕化加濃度的選擇試驗結(jié)果表明：鐵輕化加濃度為6.0×10-4mol?L-1時相對發(fā)光強度達到；隨后鐵輕化加濃度繼續(xù)增大，蛋白質(zhì)發(fā)光體系的相對發(fā)光強度反而降低。試劑pH值的選擇試驗結(jié)果表明：鐵輕化加與魯米諾的酸度對發(fā)光體系的相對發(fā)光強度都有明顯的影響，在pH為12.0和pH為12.2時，卵清白蛋白和牛血清白蛋白的發(fā)光強度和信噪比(S/N=3)達到。試樣pH值的選擇試驗結(jié)果表明：卵清白蛋白和牛血清白蛋白在pH9.0~12.2，pH9.0~12.5范圍內(nèi)，體系的相對發(fā)光強度隨著試樣溶液的pH值升高而增大；隨后試樣的pH增大相對發(fā)光強度反而降低，而且噪音增大峰形變差。選擇試樣溶液的pH分別為12.2和12.5。增敏劑的選擇試驗結(jié)果表明：聚乙二醇辛基苯基醚的加入使反應的相對發(fā)光強度降低；溴化鉀和β-環(huán)糊精能明顯增強魯米諾-鐵輕化加體系相對發(fā)光強度，但對蛋白質(zhì)-魯米諾-鐵輕化加無協(xié)同增強作用；十二烷基磺酸鈉、三氯甲烷、乙醇、甲醇、乙腈等均未顯示出明顯的協(xié)同催化效果，溴化十六烷基三甲基胺對該體系的發(fā)光具有明顯增強作用。試驗選擇5.0×10-5mol?L-1溴化十六烷基三甲基胺溶液。
蛋白質(zhì)測定儀：http://www.dsddy.cn/