PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測

【結(jié)果分析條件設(shè)定】
u 基線（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號無較大波動），起始點（Start）應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號波動，終止點（End）應(yīng)比最早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán)，建議基線設(shè)為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴增曲線的最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
1.   陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性，無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct；
2.   陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小于等于35；
3.   以上要求需在一次實驗中同時滿足，否則該次實驗視為無效。
【結(jié)果判斷】
1.   陽性：有明顯的指數(shù)擴增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對于可疑樣本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判定為陽性，否則判定為陰性；
3.   陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1.   實驗室環(huán)境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2.   試劑運輸、保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降，可能會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
具有下列特點：
1. 一站式，足夠 50 次酶切-連接反應(yīng)、50 次預(yù)擴反應(yīng)和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 體系計算），但不包括 DNA 純化和帶型分析試劑（如 PAGE 電泳試劑和 銀染試劑）。
2. 本系列產(chǎn)品提供 EcoRI-MseI 組合，適用于 GC 含量在 50%以上的基因組。對 GC 含量在 50%以下的基因組，需從本公司采購 AFLP（EcoRI-TaqI）組合。
3. 各種參數(shù)都經(jīng)過優(yōu)化，一次 PCR 所得 AFLP 片段數(shù)一般在 10-100 之間，可重復(fù) 性好，誤差小于 0.6%。4. 本產(chǎn)品適用于基因組在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如動物和植物），對于基因組 在 50-500 Mb 的材料（如細(xì)菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如質(zhì)粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分別另購專門的+1 型預(yù)擴引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 種）AFLP 引物對。

實驗外包:

1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

ACVR1 Others Human 人 ALK-2 / ACVR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 拉米夫定Lamivudine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,USP可用于細(xì)胞培養(yǎng)

人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞HRCEpiC拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)Lamivudine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

EPHA3 Others Mouse 小鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸三氟拉嗪Trifluoperazine dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>99%

牛腎細(xì)胞;MDBK鹽酸三氟拉嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Trifluoperazine dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠纖維母細(xì)胞;1/EJ 1-1 胃癌細(xì)胞，MGC80-3細(xì)胞 L-MTK細(xì)胞，鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞株皮質(zhì)甾酮/腎上腺酮Corticosterone質(zhì)量規(guī)格：>97.0%

IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 6-77) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 維達列汀;維格列汀(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品Vildagliptin

草魚腎細(xì)胞;GIK鄰乙酰水楊酸/阿司匹林質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,ARAcetylsalicylic acid

AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A2) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 芴甲氧羰酰氯（Fmoc-Cl）質(zhì)量規(guī)格：用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC)Fmoc chloride

CL-0258BC-019(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2氟羅里硅土(農(nóng)殘級)質(zhì)量規(guī)格：農(nóng)殘級Florisil?

HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系 二氫葉酸缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞，CHOdhfr細(xì)胞 CCD-1095Sk(皮膚細(xì)胞)合成硅酸鎂吸附劑(250-125um)質(zhì)量規(guī)格：250-125umMagnesium silicate adsorbent(Synthetic)

ESAM Others Rat 大鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 彈性蛋白酶質(zhì)量規(guī)格：30 units/mgElastase, pancreatic from porcine pancreas

小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL脂肪酶質(zhì)量規(guī)格：20000U/g,BRLipase

293-mTLR5 人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 293-mTLR5 DMEM+10% FBS+10ug/ml Blasticidin木聚糖酶質(zhì)量規(guī)格：BR,6萬U/GXylanase from Trichoderma viride 

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白 (His 標(biāo)簽)TAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(T)TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]

NEC(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 22RV1(前列腺癌細(xì)胞)二甲基偶氮磺III質(zhì)量規(guī)格：堿性稀土金屬用的分光光度試劑及硫酸根用鋇的沉淀滴定指示劑Dimethylsulfonazo III

黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞;YCR4-己氧基苯二甲腈(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)4-Hexyloxyphthalonitrile

C57BL/6小鼠T細(xì)胞瘤細(xì)胞;RMA 小鼠角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-羥基鄰苯二甲腈(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)4-Hydroxyphthalonitrile

 綿羊鞭蟲探針法熒光定量PCR試劑盒HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系 Human4-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4-Nitrophthalonitrile

NLGN1 Others Human 人 NLGN1 / Neuroligin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)3-Nitrophthalonitrile

人雪旺細(xì)胞裂解物HSCL4,4'-雙甲氧基三苯甲基氯質(zhì)量規(guī)格：>97%DMT-CL

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。