熒光染料的優(yōu)點:
使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。
總的來說,SYBR Green I方法是一種最基礎(chǔ)也最常用的Real-time qPCR實驗手段。
產(chǎn)品名稱 |
比氏腸微孢蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 |
Enterocytozoon bieneusi |
貨號 |
XGR96695 |
熒光化學(xué)物質(zhì):
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種:熒光探針和熒光染料?,F(xiàn)將其原理簡述如下:
1. TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術(shù)既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的首選技術(shù)平臺。
2. SYBR熒光染料:在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結(jié)合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應(yīng)是否特異。
3. 分子信標(biāo):是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)雙標(biāo)記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,導(dǎo)致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,不會產(chǎn)生熒光。PCR產(chǎn)物生成后,退火過程中,分子信標(biāo)中間部分與特定DNA序列配對,熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光 。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
象皮樹Alstonia scholaris none 1159579-45-9 C30H46O3 ≥98% 沃泥妙林 輕鹽(Y00005 HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 血液瓊脂基礎(chǔ) Blood Agar Base 供分離營養(yǎng)要求較高的致病菌用,后加血液制成血平板 IL18R1 Others Mouse 小鼠 IL18R1 / CD218a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 80-68-2DL-蘇酸;DL-α-基-β-羥基丁酸;DL-羥基丁酸;DL-異赤絲藻基酸DL-Threonine;DL-2-AMino-3-xy7noxybutanoic acid
羥本丁酯Bylp-xy7noxybenzoate100mg Rabbit plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒 D.C.L.S. 瓊脂 (脫氧膽酸鹽乳糖蔗糖) (CM0393) Oxoid incubation media D.C.L.S. 瓊脂 (脫氧膽酸鹽乳糖蔗糖) (CM0393) Oxoid BLK Others Human 人 BLK / B Lymphocyte Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 13517-23-2亞磷酸鈉,無水wo7ium PHOSPHITE-5-HYDRATE
羥本丁酯Bylp-xy7noxybenzoate100mg Rabbit plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒 D.C.L.S. 瓊脂 (脫氧膽酸鹽乳糖蔗糖) (CM0393) Oxoid incubation media D.C.L.S. 瓊脂 (脫氧膽酸鹽乳糖蔗糖) (CM0393) Oxoid BLK Others Human 人 BLK / B Lymphocyte Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 13517-23-2亞磷酸鈉,無水wo7ium PHOSPHITE-5-HYDRATE
比氏腸微孢蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Solasodine 澳洲茄銨 126-17-0 ELISAKitG6PD牛葡萄糖6磷酸脫氫酶規(guī)格:48T/96T 0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基 0.5% Dextrose Broth Medium 250克 環(huán)氧乙烷消毒和電離輻射消毒過程檢測指示菌(枯草桿菌黑色變種芽孢及短小桿菌芽孢)培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn)) hCD133+-CB-c pooled 從臍帶血提取的人類CD133+祖細(xì)胞(hCD134+-CB),混合來源 100000 大鼠腹脊髓神經(jīng)元RN-vsc OCTYL-B-D-GLUCOPYRANOSIDE辛基-β-D-葡萄糖苷蛋白組學(xué)級5G29836-26-8
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
關(guān)鍵字: 比氏腸微孢蟲探;探針法;熒光定量PCR試劑盒;Enterocytozoon biene;XGR96695;
上海西格生物科技有限公司( Shanghai Sig Biotechnology Co., Ltd)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海西格生物科技有限公司(Shanghai Sig Biotechnology Co., Ltd)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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