描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮細(xì)胞株,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱
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Hela人子宮頸癌細(xì)胞說明書
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規(guī)格
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T25m2
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貨號
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FSX6325
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細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
細(xì)胞凍存:
對培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行凍存的方法是將細(xì)胞置于含有(DMSO)等冷凍保護(hù)劑的完全培養(yǎng)基中于液氮中儲存。冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險(xiǎn) (冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。
注:DMSO 可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí),應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。
細(xì)胞凍存指導(dǎo)原則
凍存細(xì)胞系以備將來之用時(shí),必須遵守以下原則。與其他細(xì)胞培養(yǎng)操作一樣,我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說明,以便獲得結(jié)果。
1)在高細(xì)胞濃度情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,并且細(xì)胞傳代次數(shù)盡可能少。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細(xì)胞系。
2)細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑
4)將冷凍的細(xì)胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時(shí),冷凍的細(xì)胞將開始變質(zhì)。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細(xì)胞。裝有冷凍細(xì)胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存
6)必須穿戴個(gè)人防護(hù)設(shè)備。
7)所有與細(xì)胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術(shù),并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。
靛玉紅Indirubin479-41-420mg
靛藍(lán)Indigo482-89-320mg
白樺脂酸Betulinic acid 472-15-120mg
白樺脂醇Betulin473-98-320mg
白樺脂醛Betulinicaldehyde13159-28-920mg
表白樺脂酸Epibetulinic acid38736-77-520mg
路路通酸Liquidambaric acid4481-62-320mg
白花前胡甲素praeruptorin A73069-25-720mg
白花前胡乙素praeruptorin B81740-07-020mg
白花前胡丙素Praeruptorin C72463-77-5/83382-71-220mg
白花前胡丁素 Praeruptorin D20mg
紫花前胡苷Nodakenin495-31-820mg
歐前胡素Imperatorin482-44-020mg
異歐前胡素Isoimperatorin482-45-120mg
杯莧甾酮Cyasterone17086-76-920mg
Hela人子宮頸癌細(xì)胞說明書三羥甲基甲基甘氨酸野黃芩苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品Homo sapiens (Human)
亞磷酸正丁酯花旗松素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%Mus musculus (Mouse)
構(gòu)緣酸三丁酯蔓荊子黃素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%(HPLC)Homo sapiens (Human)
硼酸三丁酯二苯胍 97%Homo sapiens (Human)
水合磷酸三銨三聚硫氰酸 95%Homo sapiens (Human)
枸櫞酸銨偏硅酸鈉,五水 95%Homo sapiens (Human)
1-三十烷醇零水偏硅酸鈉 SiO2, 44-47% Homo sapiens (Human)
鐵傳遞蛋白偏硅酸鈉,九水 ARHomo sapiens (Human)
玉米素核苷鈦酸四丁酯 CP,98.0%Homo sapiens (Human)
反式玉米素鈦酸四丁酯 ≥99.0% (GC)Mus musculus (Mouse)
反式阿魏酸薯蕷皂素 90%Rattus norvegicus (Rat)
茴香樟腦橙皮素 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥98%Homo sapiens (Human)
反-2-己烯酸橙皮素 97%Mus musculus (Mouse)
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
關(guān)鍵字: Hela人子宮頸癌細(xì)胞;T25m2;FSX6325;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
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