注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)
BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M046小鼠腸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]2-溴-9,9-二甲基芴(>98.0%(GC))2-Bromo-9,9-dimethylfluorene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
獼猴皮膚細(xì)胞;MMS42,7-二氨基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Diaminofluorene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 9-溴-10-苯基蒽(>98.0%(GC))9-Bromo-10-phenylanthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2-氯蒽(>98.0%(GC))2-Chloroanthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
SK23細(xì)胞,人色素瘤細(xì)胞 嗜熱乳酸鏈球菌 人腦瘤細(xì)胞;SF179,10-二氯蒽(>96.0%(GC))9,10-Dichloroanthracene質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞亞甲藍(lán)(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Methylthioninium Chloride Trihydrate
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 小鼠精母細(xì)胞,GC-2spd細(xì)胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮細(xì)胞)華法林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測(cè)定用Warfarin
人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞;UT-7華法林鈉質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRWarfarin
CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 洛莫司汀(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測(cè)定Lomustine
小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA度洛西汀質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Duloxetine
TDGF1 Protein Human 重組人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)偏重亞鉀500克RT
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC 人胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL三基錄硅烷 Chlorotriqthylsilcnq 994-30-9
人癌細(xì)胞;MDA-MB-157異胍 (常規(guī)) Guanidine thiocyanate (≥97.0%) 593-84-0 25G 通用試劑
TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) PEA瓊脂10張/盒
CM-H134人角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL(二甲亞砜)
星形細(xì)胞生長(zhǎng)添加物AGS馬來酸,英文名或英文縮寫:Maleic acid,級(jí)別:USP級(jí),50萬u/g,規(guī)格:25克
TE 354.T細(xì)胞,人皮膚基底細(xì)胞癌 人胚腎細(xì)胞,AAV-293細(xì)胞 原代單核細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml2-基炳1;異;1,1-二基1 2-Mqthylpropqnq;Isobutqnq; Isobutylqnq;1,1-DiMqthylqthylqnq 112-11-7
盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS3腺甙脫酶,英文名或英文縮寫:ADA,級(jí)別:BR,10u/ul,規(guī)格:1克
S100A1 Others Human 人 S100A1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-絲酸鹽酸鹽100克
T-104AII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mLPHA-P 5mg/10mg Sigma分裝
操作流程:
FOR Kallikrein-5 ELISA Kit(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。