PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:口蹄疫病毒O型(FMDV-O)核酸檢測(cè)試劑盒
英文名稱:詳見(jiàn)說(shuō)明書
編號(hào): FSP2894
分類:核酸檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) ELISA KitHuman APLP2(Amyloid-like protein 2) ELISA KitL-抗壞血酸RNA電泳樣品處理液
Human IL2RG(Cytokine receptor common subunit gamma) ELISA KitHuman APPL2(DCC-Interacting Protein 13-Beta) ELISA Kit維生素C分子生物級(jí)溴化乙錠(Ethidium Bromide)染色液(1毫克/毫升)或(10毫克/毫升)
Human DSG3(Desmoglein-3) ELISA KitHuman ARHGDIB(Rho GDP-dissociation inhibitor 2) ELISA KitL-谷氨酸SYBR綠色熒光核酸染色試劑盒(配制25毫升/次)
Human NOX1(NADPH oxidase 1) ELISA KitHuman ARNTL(Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator-like protein 1) ELISA KitL-谷氨酸SYBR綠色熒光核酸染色(20X)
Human LAD1(Ladinin-1) ELISA KitHuman ASTL(Astacin-like metalloendopeptidase) ELISA KitL-谷氨酸溴酚藍(lán)(BROMPHENOL BLUE)溶液(100毫克/毫升)
Human ITGA5(Integrin alpha-5) ELISA KitHuman ATG7(Autophagy-related protein 7) ELISA KitL-纈氨酰胺鹽酸鹽DNA銀染試劑盒
Human XBP1(X-box-binding protein 1) ELISA KitHuman ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA KitL-纈氨酰胺鹽酸鹽細(xì)胞熒光素酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒
Human DKK2(Dickkopf-related protein 2) ELISA KitHuman AXL(Tyrosine-protein kinase receptor UFO) ELISA KitL-纈氨酰胺鹽酸鹽細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性原位染色試劑盒
口蹄疫病毒O型(FMDV-O)核酸檢測(cè)試劑盒酚紅鈉鹽 20mg 108-37-2Rat prostate specific antigen, PSA Elisa KitHPLC98%酚紅鈉鹽 20mgIL-8進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)一般細(xì)菌培養(yǎng)英文名稱:75mg重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)916917-28-796T雄烯二酮(ASD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%酚紅鈉鹽 20mgIL-869242-40-6高端化學(xué)試劑Human brain natriuretic peptide, BNP Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)一般細(xì)菌培養(yǎng)英文名稱:Dantrolene200mg重組人 NCF-2 / NCF2 / P67phox 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷97230-46-196T胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%酚紅鈉鹽 20mgβGAL69242-40-6高端化學(xué)試劑Human cytokeratin 20, CK20 Elisa Kit
酚紅鈉鹽 20mg 108448-77-7Rat prostate specific antigen, PSA Elisa KitHPLC98%酚紅鈉鹽 20mgβGAL進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)一般細(xì)菌培養(yǎng)英文名稱:Dantrolene200mg重組人 NCF-2 / NCF2 / P67phox 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷97230-46-196T胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%酚紅鈉鹽 20mgβGAL69242-40-6高端化學(xué)試劑Human cytokeratin 20, CK20 Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)用于靛基質(zhì)試驗(yàn)英文名稱:Rifabutin50mg重組人 Biotinidase / Biotinase / BTD 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷620-61-196T胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%B-藻紅蛋白20mgSBPase69242-40-6高端化學(xué)試劑Human cytokeratin 20, CK20 Elisa Kit
B-藻紅蛋白20mg 108448-77-7Rat ovarian cancer marker-CA125 Elisa KitHPLC98%B-藻紅蛋白20mgSBPase進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)用于靛基質(zhì)試驗(yàn)英文名稱:Rifabutin50mg重組人 Biotinidase / Biotinase / BTD 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷620-61-196T胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%B-藻紅蛋白20mgSBPase69242-40-6高端化學(xué)試劑Human cytokeratin 20, CK20 Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)英文名稱:Methicillin Sodium (AS)500mg重組人 GMPR / GMPR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)41682-24-096T胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%交聯(lián)藻藍(lán)蛋白20mgSM-IgG20274-89-9高端化學(xué)試劑human Beta-Endorphin, β-EP Elisa Kit
交聯(lián)藻藍(lán)蛋白20mg 108448-77-7Rat ovarian cancer marker-CA125 Elisa KitHPLC98%交聯(lián)藻藍(lán)蛋白20mgSM-IgG進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)英文名稱:Methicillin Sodium (AS)500mg重組人 GMPR / GMPR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)41682-24-096T胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%交聯(lián)藻藍(lán)蛋白20mgSM-IgG20274-89-9高端化學(xué)試劑human Beta-Endorphin, β-EP Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)常用細(xì)菌斜面?zhèn)鞔⑽拿Q:Oxacillin Sodium 200mg重組人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)106647-14-796T表睪酮(ET)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%C-藻藍(lán)蛋白20mgsSEMA7A20274-89-9高端化學(xué)試劑human Beta-Endorphin, β-EP Elisa Kit
C-藻藍(lán)蛋白20mg 108-52-1Rat mammary carcinoma Marker-CA153 Elisa KitHPLC98%C-藻藍(lán)蛋白20mgsSEMA7A進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)常用細(xì)菌斜面?zhèn)鞔⑽拿Q:Oxacillin Sodium 200mg重組人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)106647-14-796T表睪酮(ET)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%C-藻藍(lán)蛋白20mgsSEMA7A20274-89-9高端化學(xué)試劑human Beta-Endorphin, β-EP Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)供分離營(yíng)養(yǎng)要求較高的致病菌用英文名稱:50mg重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷329361-25-396T雌二醇(E2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%別藻藍(lán)蛋白20mgβ-cm107-35-7高端化學(xué)試劑Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP Elisa Kit
別藻藍(lán)蛋白20mg 108-52-1Rat mammary carcinoma Marker-CA153 Elisa KitHPLC98%別藻藍(lán)蛋白20mgβ-cm進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)供分離營(yíng)養(yǎng)要求較高的致病菌用英文名稱:50mg重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷329361-25-396T雌二醇(E2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%別藻藍(lán)蛋白20mgβ-cm107-35-7高端化學(xué)試劑Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)結(jié)核桿菌的培養(yǎng),計(jì)數(shù)保存,照光試驗(yàn),藥物敏感性測(cè)定及菌型鑒定英文名稱:Sulfamethoxazole 200mg重組人 PSME3 / PA28-gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷105317-67-796T1,25-二羥基維生素D3(DHVD3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%R-藻紅蛋白20mgJEV-IgG Ab107-35-7高端化學(xué)試劑Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP Elisa Kit
R-藻紅蛋白20mg 108-52-1Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA199 Elisa KitHPLC98%R-藻紅蛋白20mgJEV-IgG Ab進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)結(jié)核桿菌的培養(yǎng),計(jì)數(shù)保存,照光試驗(yàn),藥物敏感性測(cè)定及菌型鑒定英文名稱:Sulfamethoxazole 200mg重組人 PSME3 / PA28-gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷105317-67-796T1,25-二羥基維生素D3(DHVD3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%R-藻紅蛋白20mgJEV-IgG Ab107-35-7高端化學(xué)試劑Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)分枝桿菌的分離培養(yǎng)英文名稱:Mestranol200mg重組人 COMMD8 蛋白 (His 標(biāo)簽)184288-35-596T衰變加速因子(DAF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6-氨基己醇20mgGliadin-IgA107-35-7高端化學(xué)試劑Human Pro Atrial Natriuretic Peptide, Pro-ANP Elisa Kit
6-氨基己醇20mg 108-85-0Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA199 Elisa KitHPLC98%6-氨基己醇20mgGliadin-IgA進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)分枝桿菌的分離培養(yǎng)英文名稱:Mestranol200mg重組人 COMMD8 蛋白 (His 標(biāo)簽)184288-35-596T衰變加速因子(DAF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%6-氨基己醇20mgGliadin-IgA107-35-7高端化學(xué)試劑Human Pro Atrial Natriuretic Peptide, Pro-ANP Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)分枝桿菌的分離培養(yǎng)英文名稱:Methylene Blue 250mg重組人 PA28A / PSME1 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)59952-97-596T骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%6-氨基己醇20mgPF-4;CXCL43144-16-9高端化學(xué)試劑Human Pro Atrial Natriuretic Peptide, Pro-ANP Elisa Kit
6-氨基己醇20mg 108-85-0Rat heme oxygenase 1, HO-1 Elisa KitHPLC95%6-氨基己醇20mgPF-4;CXCL4進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)分枝桿菌的分離培養(yǎng)英文名稱:Methylene Blue 250mg重組人 PA28A / PSME1 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)供應(yīng)59952-97-596T骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC95%6-氨基己醇20mgPF-4;CXCL43144-16-9高端化學(xué)試劑Human Pro Atrial Natriuretic Peptide, Pro-ANP Elisa Kit 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)分離培養(yǎng)和鑒別氣單胞菌英文名稱:L-Threonine 200mg重組人 Phosphomannomutase 2 / PMM2 / CDG1 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷79103-90-596T骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%N-BOC-尸胺20mgHLA-Dr153144-16-9高端化學(xué)試劑Human cytokeratin 13, CK-13 Elisa Kit
N-BOC-尸胺20mg 108-85-0Rat heme oxygenase 1, HO-1 Elisa KitHPLC98%N-BOC-尸胺20mgHLA-Dr15進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)分離培養(yǎng)和鑒別氣單胞菌英文名稱:L-Threonine 200mg重組人 Phosphomannomutase 2 / PMM2 / CDG1 蛋白 (His 標(biāo)簽)現(xiàn)貨促銷79103-90-596T骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%N-BOC-尸胺20mgHLA-Dr153144-16-9高端化學(xué)試劑Human cytokeratin 13, CK-13 Elisa Kit進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)曲霉菌分離培養(yǎng)英文名稱:L-Valine 200mg重組人 PSME2 / PA28b 蛋白 (His 標(biāo)簽)特價(jià)促銷120406-37-396T骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%N-BOC-尸胺20mgERα3144-16-9高端化學(xué)試劑Human cytokeratin 13, CK-13 Elisa Kit
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字: 口蹄疫病毒O型(FMDV-O);核酸檢測(cè)試劑盒;48T;FSP2894;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!
公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問(wèn)題可申請(qǐng)退換,有技術(shù)疑問(wèn)可隨時(shí)給于解答,一對(duì)一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。