PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng)：轉(zhuǎn)基因植物Sad基因PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng)：詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
編號(hào)： FSP2834
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Human NKA(Neurokinin A) ELISA KitHuman proPSA(precursor of Prostate Specific Antigen) ELISA Kit鄰碘苯甲酸 細(xì)胞JNK/SAPK蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

Human MMP-10(Matrix Metalloproteinase 10) ELISA KitHuman PRR4(Proline Rich Protein 4, Lacrimal) ELISA Kit溴代異丁烷 JNK/SAPK蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

Human MUC3(Mucin 3) ELISA KitHuman PRSS23(Protease, Serine 23) ELISA Kit淫羊藿苷J(rèn)NK/SAPK蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

Human MUC6(Mucin 6) ELISA KitHuman PRSS33(Protease, Serine 33) ELISA Kit3-碘-4-氨基吡啶JNK/SAPK蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒

Human N-MID-OT(N-MID Osteocalcin) ELISA KitHuman PSAP(Prosaposin) ELISA Kit3-碘-4-氨基吡啶 細(xì)胞TUBULIN蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒

Human NKB(Neurokinin B) ELISA KitHuman PSPN(Persephin) ELISA Kit乙酸異丙酯載玻片細(xì)胞TUBULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

Human MUSKab(Muscle Skeletal Receptor Tyrosine Kinase antibody) ELISA KitHuman PTD(Pentosidine) ELISA Kit異甘草素冰凍切片組織TUBULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

Human NPYR1(Neuropeptide Y Receptor Y1) ELISA KitHuman PTF1α(Pancreas Specific Transcription Factor 1α) ELISA Kit焦磷酸鐵(III)石蠟切片組織TUBULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物Sad基因PCR檢測(cè)試劑盒亞細(xì)亞皂苷凝血酶原時(shí)間（PT）測(cè)定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mg14432-12-3Rat Gonadotropin-releasing hormone receptor, GnRHR Elisa KitHPLC98%凝血酶原時(shí)間（PT）測(cè)定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mgADRP25mgCAS號(hào)：針頭濾器 可換膜 直徑25mm 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒517-28-289130-86-996T高爾基蛋白73(GP73)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%凝血酶原時(shí)間（PT）測(cè)定試劑盒ISI1.0-1.3<含復(fù)溶液>5mgADRP3737-95-9高端化學(xué)試劑硬脂酰輔酶A去飽和酶(SCD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)13mm 水系 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.22um 8005-03-6103917-26-696T脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%部分凝血活酶時(shí)間(APTT)測(cè)定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK1D1667-99-8高端化學(xué)試劑17-β-羥基類(lèi)固醇脫氫酶10(HSD17β10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

部分凝血活酶時(shí)間(APTT)測(cè)定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mg15663-27-1Rat Gonadotropin-releasing hormone receptor, GnRHR Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶時(shí)間(APTT)測(cè)定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK1D50mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)13mm 水系 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.22um 8005-03-6103917-26-696T脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%部分凝血活酶時(shí)間(APTT)測(cè)定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK1D1667-99-8高端化學(xué)試劑17-β-羥基類(lèi)固醇脫氫酶10(HSD17β10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)eaCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)25mm 水系 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.22um 8005-02-599882-10-796T黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%部分凝血活酶時(shí)間(APTT)測(cè)定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK41667-99-8高端化學(xué)試劑肌鈣蛋白I(TNI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

部分凝血活酶時(shí)間(APTT)測(cè)定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mg15663-27-1Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase, AMPK Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶時(shí)間(APTT)測(cè)定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK4eaCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)25mm 水系 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.22um 8005-02-599882-10-796T黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%部分凝血活酶時(shí)間(APTT)測(cè)定試劑盒<鞣花酸含cacl2>5mgCAMK41667-99-8高端化學(xué)試劑肌鈣蛋白I(TNI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)13mm 有機(jī) 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.22um 4197-07-3479-21-096TAMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%0.025M化鈣5mgHSPA12A84166-13-2高端化學(xué)試劑周期素依賴(lài)性激酶5(CDK5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

0.025M化鈣5mg15362-40-0Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase, AMPK Elisa KitHPLC98%0.025M化鈣5mgHSPA12A50mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)13mm 有機(jī) 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.22um 4197-07-3479-21-096TAMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%0.025M化鈣5mgHSPA12A84166-13-2高端化學(xué)試劑周期素依賴(lài)性激酶5(CDK5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)200mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)25mm 有機(jī) 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.22um 4197-07-381371-54-296T肺部激活調(diào)節(jié)趨化因子(PARC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%凝血酶時(shí)間(TT)測(cè)定試劑盒5mgHSP1733-12-6高端化學(xué)試劑補(bǔ)體1q(C1q)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

凝血酶時(shí)間(TT)測(cè)定試劑盒5mg15362-40-0Rat heat shock protein, HSP47 Elisa KitHPLC98%凝血酶時(shí)間(TT)測(cè)定試劑盒5mgHSP200mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)25mm 有機(jī) 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.22um 4197-07-381371-54-296T肺部激活調(diào)節(jié)趨化因子(PARC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%凝血酶時(shí)間(TT)測(cè)定試劑盒5mgHSP1733-12-6高端化學(xué)試劑補(bǔ)體1q(C1q)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)15mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)13mm 水系 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.45um148-25-4100234-59-196T轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%凝血酶時(shí)間(TT)測(cè)定試劑盒<含復(fù)溶液>5mgPGAM51733-12-6高端化學(xué)試劑N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2C(GRIN2C)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

辣椒素（天然純化分離）凝血酶時(shí)間(TT)測(cè)定試劑盒<含復(fù)溶液>5mg652-67-5Rat heat shock protein, HSP47 Elisa KitHPLC98%凝血酶時(shí)間(TT)測(cè)定試劑盒<含復(fù)溶液>5mgPGAM515mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)13mm 水系 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.45um148-25-4100234-59-196T轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%凝血酶時(shí)間(TT)測(cè)定試劑盒<含復(fù)溶液>5mgPGAM51733-12-6高端化學(xué)試劑N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2C(GRIN2C)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)25mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)25mm 水系 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.45um5808-22-0112503-87-496T胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mg14-15-D H62625-29-0高端化學(xué)試劑N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2B(GRIN2B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

二氫辣椒素纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mg652-67-5Rat glucocorticoid, GC Elisa KitHPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mg14-15-D H25mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)25mm 水系 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.45um5808-22-0112503-87-496T胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mg14-15-D H62625-29-0高端化學(xué)試劑N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2B(GRIN2B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)350mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)13mm 有機(jī) 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.45um5808-22-0226560-96-996T白介素12B(IL12B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mghistidine62625-29-0高端化學(xué)試劑鞘氨醇-1-酸酸酶2(SGPP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

胡椒酰胺纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mg652-67-5Rat glucocorticoid, GC Elisa KitHPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mghistidine350mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)13mm 有機(jī) 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.45um5808-22-0226560-96-996T白介素12B(IL12B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs、定標(biāo)血漿>5mghistidine62625-29-0高端化學(xué)試劑鞘氨醇-1-酸酸酶2(SGPP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)50mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)25mm 有機(jī) 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.45um5808-22-0226561-02-096T促性腺激素釋放激素受體(GnRHR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs>5mgHSV1-Ab1393-92-6高端化學(xué)試劑谷氨酸半胱氨酸連接酶(GCLM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs>5mg154-42-7Rat Citrate synthase, CS Elisa KitHPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs>5mgHSV1-Ab50mgCAS號(hào)：針頭濾器(直徑)25mm 有機(jī) 一次性 25個(gè)/袋 100個(gè)/盒 0.45um5808-22-0226561-02-096T促性腺激素釋放激素受體(GnRHR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs>5mgHSV1-Ab1393-92-6高端化學(xué)試劑谷氨酸半胱氨酸連接酶(GCLM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)25mgCAS號(hào)：移液器92-32-041137-85-396T孕酮受體(PGR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs>5mgM-CSF1393-92-6高端化學(xué)試劑鞘氨醇-1-酸酸酶1(SGPP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

射干苷纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs>5mg154-42-7Rat Citrate synthase, CS Elisa KitHPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs>5mgM-CSF25mgCAS號(hào)：移液器92-32-041137-85-396T孕酮受體(PGR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%纖維蛋白原(BFI)測(cè)定試劑盒<含ibs>5mgM-CSF1393-92-6高端化學(xué)試劑鞘氨醇-1-酸酸酶1(SGPP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)25mgCAS號(hào)：助理移液器 10mL92-32-055497-79-596T激肽釋放酶1(KLK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%清洗液5mgTGF2591-17-5高端化學(xué)試劑骨涎蛋白(BSP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。