儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:乙型肝炎病毒拉米夫定耐藥PCR試劑盒
英文名稱:詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
編號(hào): FSP2765
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
Human ACAP1 ELISA KitHuman 14-3-3 protein eta(YWHAH) ELISA Kit1-羥基苯并三唑一水合物 細(xì)胞PAR-2蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
Human USP18(Ubiquitin Specific Peptidase18) ELISA KitHuman GLDC(Glycine Dehydrogenase) ELISA Kit1-羥基苯并三唑一水合物 PAR-2蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
Human HDAC(Histone deacetylase) ELISA KitHuman his(Histamine) ELISA Kit對(duì)苯二酚PAR-2蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
Human NAG(Neutral alpha-glucosidase) ELISA KitHuman S1P(Sphingosine 1 Phosphate) ELISA Kit6-(1H-吡唑-1-基)煙酸PAR-2蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
Human SSC5D(Soluble scavenger receptor cysteine-rich domain-containing protein SSC5D) ELISA KitHuman Ang1-7(Angiotensin 1-7) ELISA Kit6-(1H-吡唑-1-基)煙酸 細(xì)胞PAR-3蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒
Human DEFB105(Beta-defensin 105) ELISA KitHuman ACV-B(Activin B) ELISA Kit4-氨基-1H-吡唑載玻片細(xì)胞PAR-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human Foxj1(Forkhead box protein J1) ELISA KitHuman ADAMTS12(A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 12) ELISA Kit2-羥基-4-甲基吡啶冰凍切片組織PAR-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
Human IS(serum indoxyl sulfate) ELISA KitHuman ADCY2(Adenylate Cyclase 2) ELISA Kit2-羥基-4-甲基吡啶石蠟切片組織PAR-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
乙型肝炎病毒拉米夫定耐藥PCR試劑盒膽紅素氧化代謝物 ELISA試劑盒20mgL-天門(mén)冬氨酸-4-叔丁基酯HPLC98%100mLBiopyrrin ELISA KitHPLC98%膽紅素氧化代謝物 ELISA試劑盒20mgTKT1.2ml×3ampulesCAS號(hào):麥芽浸粉24390-14-56246-46-496TSmad同源物1(Smad1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%膽紅素氧化代謝物 ELISA試劑盒20mgTKT51707-55-2高端化學(xué)試劑糖磺基轉(zhuǎn)移酶8(CHST8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)200mgCAS號(hào):麥芽汁 24390-14-535833-62-696T含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白檢測(cè)試劑盒10mgTF51707-55-2高端化學(xué)試劑糖磺基轉(zhuǎn)移酶10(CHST10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白檢測(cè)試劑盒10mgL-天門(mén)冬氨酸-4-叔丁基酯HPLC98%100mLCETP ELISA KitHPLC98%膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白檢測(cè)試劑盒10mgTF200mgCAS號(hào):麥芽汁 24390-14-535833-62-696T含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白檢測(cè)試劑盒10mgTF51707-55-2高端化學(xué)試劑糖磺基轉(zhuǎn)移酶10(CHST10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1.2ml×3ampulesCAS號(hào):棉籽餅粉 水溶性棉籽餅粉24390-14-589913-60-096TⅠ型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXⅠ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%膽固醇7α-羥化酶檢測(cè)試劑盒20mgNK51707-55-2高端化學(xué)試劑糖磺基轉(zhuǎn)移酶11(CHST11)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
膽固醇7α-羥化酶檢測(cè)試劑盒20mgL-天門(mén)冬氨酸-4-叔丁基酯HPLC98%100mLCYP7A ELISA KitHPLC98%膽固醇7α-羥化酶檢測(cè)試劑盒20mgNK1.2ml×3ampulesCAS號(hào):棉籽餅粉 水溶性棉籽餅粉24390-14-589913-60-096TⅠ型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXⅠ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%膽固醇7α-羥化酶檢測(cè)試劑盒20mgNK51707-55-2高端化學(xué)試劑糖磺基轉(zhuǎn)移酶11(CHST11)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)15mgCAS號(hào):泡敵粉24390-14-519275-46-896T分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%膽固醇檢測(cè)試劑盒20mgBECN151707-55-2高端化學(xué)試劑糖磺基轉(zhuǎn)移酶12(CHST12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
膽固醇檢測(cè)試劑盒20mgN6-苯甲?;?脫氧腺苷HPLC98%100mLcholesterol,CH ELISA KitHPLC98%膽固醇檢測(cè)試劑盒20mgBECN115mgCAS號(hào):泡敵粉24390-14-519275-46-896T分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%膽固醇檢測(cè)試劑盒20mgBECN151707-55-2高端化學(xué)試劑糖磺基轉(zhuǎn)移酶12(CHST12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)500mgCAS號(hào):試劑級(jí)玉米漿(蛋白酶水解)1173-88-287-51-496T果糖二酸醛縮酶A(ALDOA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單絲氨酸蛋白激酶1檢測(cè)試劑盒250mgULBPs高端化學(xué)試劑糖磺基轉(zhuǎn)移酶13(CHST13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
單絲氨酸蛋白激酶1檢測(cè)試劑盒250mg對(duì)碘苯腈HPLC98%100mLLIMK1 ELISA KitHPLC98%單絲氨酸蛋白激酶1檢測(cè)試劑盒250mgULBPs500mgCAS號(hào):試劑級(jí)玉米漿(蛋白酶水解)1173-88-287-51-496T果糖二酸醛縮酶A(ALDOA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單絲氨酸蛋白激酶1檢測(cè)試劑盒250mgULBPs高端化學(xué)試劑糖磺基轉(zhuǎn)移酶13(CHST13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)100mgCAS號(hào):水溶性花生餅粉1173-88-220784-60-596T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白4檢測(cè)試劑盒20mgAβ高端化學(xué)試劑Cochlin蛋白(COCH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
單核細(xì)胞趨化蛋白4檢測(cè)試劑盒20mg對(duì)碘苯腈HPLC98%100mLMCP-4 ELISA kitHPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白4檢測(cè)試劑盒20mgAβ100mgCAS號(hào):水溶性花生餅粉1173-88-220784-60-596T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白4檢測(cè)試劑盒20mgAβ高端化學(xué)試劑Cochlin蛋白(COCH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)500mgCAS號(hào):水溶性黃豆餅粉1173-88-292117-94-796T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白3檢測(cè)試劑盒10mgTB高端化學(xué)試劑中心體BRCA2相互作用蛋白(CNTROB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
單核細(xì)胞趨化蛋白3檢測(cè)試劑盒10mg優(yōu)降寧HPLC98%100mLMCP-3 ELISA kitHPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白3檢測(cè)試劑盒10mgTB500mgCAS號(hào):水溶性黃豆餅粉1173-88-292117-94-796T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白3檢測(cè)試劑盒10mgTB高端化學(xué)試劑中心體BRCA2相互作用蛋白(CNTROB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)500mgCAS號(hào):水溶性棉籽餅粉 水溶性棉籽餅粉(發(fā)酵專用)59703-84-392117-94-796T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白2檢測(cè)試劑盒20mgTBA高端化學(xué)試劑末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(DNTT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
單核細(xì)胞趨化蛋白2檢測(cè)試劑盒20mg優(yōu)降寧HPLC98%100mLMCP-2 ELISA kitHPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白2檢測(cè)試劑盒20mgTBA500mgCAS號(hào):水溶性棉籽餅粉 水溶性棉籽餅粉(發(fā)酵專用)59703-84-392117-94-796T27kDa熱休克蛋白(HSPB1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白2檢測(cè)試劑盒20mgTBA高端化學(xué)試劑末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(DNTT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)200mgCAS號(hào):水溶玉米蛋白粉59703-84-381991-99-396TⅠ型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXⅠ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白1檢測(cè)試劑盒20mgTP高端化學(xué)試劑角化蛋白(CNFN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
單核細(xì)胞趨化蛋白1檢測(cè)試劑盒20mg(S)-(-)-1,2-環(huán)氧丁烷HPLC98%100mLMCP-1 ELISA kitHPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白1檢測(cè)試劑盒20mgTP200mgCAS號(hào):水溶玉米蛋白粉59703-84-381991-99-396TⅠ型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXⅠ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單核細(xì)胞趨化蛋白1檢測(cè)試劑盒20mgTP高端化學(xué)試劑角化蛋白(CNFN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)500mgCAS號(hào):土豆浸粉59703-84-317320-10-496TⅠ型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXⅠ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單純皰疹病抗原-1檢測(cè)試劑盒20mgTT4高端化學(xué)試劑Claspin蛋白(CLSPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
單純皰疹病抗原-1檢測(cè)試劑盒20mg(S)-(-)-1,2-環(huán)氧丁烷HPLC98%100mLHerpes simplex virus,HSV-Ag1 ELISA KitHPLC98%單純皰疹病抗原-1檢測(cè)試劑盒20mgTT4500mgCAS號(hào):土豆浸粉59703-84-317320-10-496TⅠ型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXⅠ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單純皰疹病抗原-1檢測(cè)試劑盒20mgTT4高端化學(xué)試劑Claspin蛋白(CLSPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)200mgCAS號(hào):玉米淀粉 FA029059703-84-327918-19-096T50kDa核孔蛋白(NUP50)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)HPLC98%單純皰疹病Ⅱ型抗體IgM檢測(cè)試劑盒20mgT-AOC高端化學(xué)試劑Calmin蛋白(CLMN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
關(guān)鍵字: 乙型肝炎病毒拉米夫定耐藥;PCR試劑盒;50T;FSP2765;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門(mén)針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚(yú))的科研試劑。
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