PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱：鴨肝炎病毒PCR
英文名稱：詳見說明書
編號： FSP2755
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Human ARNTL(Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator-like protein 1) ELISA KitHuman EBI3(Interleukin-27 subunit beta) ELISA Kit乙酸正己酯 細胞CDK6蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
Human AMIGO2 ELISA KitHuman LILRA2(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 2) ELISA Kit1-羥基-7-偶氮苯并三氮唑載玻片細胞CDK6蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
Human AGR3 ELISA KitHuman LILRB1(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 1) ELISA Kit1-羥基-7-偶氮苯并三氮唑冰凍切片組織CDK6蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
Human AGS3 ELISA KitHuman EGFL7(Epidermal growth factor-like protein 7) ELISA KitHydroxy(1,5-cyclooctadiene)rhodium(I) dimer,[Rh(COD)(OH)]2石蠟切片組織CDK6蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
Human AHSA1 ELISA KitHuman ECE1(Endothelin-converting enzyme 1) ELISA Kit2-巰基吡啶-N-氧化物 鋅鹽 載玻片細胞CDK6蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
Human AREG(Amphiregulin) ELISA KitHuman NDNF(Protein NDNF) ELISA Kit2-巰基吡啶-N-氧化物 鋅鹽 冰凍切片組織CDK6蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
Human AMPK beta 2 ELISA KitHuman ATP2A3(Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 3) ELISA Kit2-羥基-2-甲基苯丙酮 石蠟切片組織CDK6蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
Human AK3L1 ELISA KitHuman IFNA14(Interferon alpha-14) ELISA Kit2-羥基-2-甲基苯丙酮 細胞CDK6蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
鴨肝炎病毒PCR 人結(jié)腸細胞嗜桿 Lactobacillus acidophilus 孢他五水化合物 Ceftazidime Pentahydrate
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字： 鴨肝炎病毒;PCR;50T;FSP2755;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒；另有針對各種動物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。
公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù)，力求為我國科研事業(yè)更好的，更專業(yè)的服務(wù)！
公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換，有技術(shù)疑問可隨時給于解答，一對一的客服服務(wù)，客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。