儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱(chēng)：輪狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng)：詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
編號(hào)： FSP2582
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
Human LPHN3 ELISA KitHuman PGAP1(Post-GPI attachment to proteins factor 1) ELISA Kit十二烷基二甲基胺乙內(nèi)酯人支氣管成纖維細(xì)胞

Human LRR 1(Leucine-rich repeat protein 1) ELISA KitHuman LPAR3(Lysophosphatidic acid receptor 3) ELISA Kit十二烷基二甲基胺乙內(nèi)酯人骨骼肌細(xì)胞

Human LPP ELISA KitHuman PGM1(Phosphoglucomutase-1) ELISA Kit乙烯基二苯基膦人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞

Human LPIN2 ELISA KitHuman UBE2A(Ubiquitin-conjugating enzyme E2 A) ELISA Kit乙烯基二苯基膦人骨骼肌成肌細(xì)胞

Human LPPR2 ELISA KitHuman PHD2(Prolyl hydroxylase domain-containing protein 2) ELISA Kit二噻吩[3,2-b:2',3'-d]噻吩人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞

Human LPXN ELISA KitHuman MUSK(Muscle, skeletal receptor tyrosine-protein kinase) ELISA Kit二噻吩[3,2-b:2',3'-d]噻吩人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞

Human LRAT ELISA KitHuman PHF20(PHD finger protein 20) ELISA KitN,N-二甲基甲酰胺二甲縮醛人腎小管上皮細(xì)胞

Human LPIN2 ELISA KitHuman AMACR(Alpha-methylacyl-CoA racemase) ELISA KitN,N-二甲基甲酰胺二甲縮醛人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞
輪狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒Homo sapiens, humanDonkey Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG3,4-二氯苯甲酰甲酸乙酯LMP2AEB病毒LMP-2A蛋白抗體特價(jià)促銷(xiāo)

Mus musculus, mouseDonkey Anti-Guinea pig IgG/APC  APC標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG3-(4-溴苯基)吡啶ADAM2去整合素樣金屬蛋白酶2抗體特價(jià)促銷(xiāo)

Wallemia sebi (Fries) von ArxDonkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG2,4-二氯-3-乙基-6-硝基苯酚MLCK肌球蛋白輕鏈激酶抗體特價(jià)促銷(xiāo)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG環(huán)丙磺酰氯Acetyl-Histone H4(K5)乙?；M蛋白H4抗體特價(jià)促銷(xiāo)

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG3-(2-甲基喹啉-1-基)丙烷-1-磺酸內(nèi)鹽Acetyl-Histone H4(K16)乙?；M蛋白H4(K16)抗體特價(jià)促銷(xiāo)

Gyrodon lividus (Bulliard : Fries) SaccardoDonkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG3-氯-2-肼基砒啶AFP甲胎蛋白抗體特價(jià)促銷(xiāo)

Mus musculus, mouseDonkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG2-氨基-5-溴-2'-氟二苯甲酮AEV(Avian Encephalomyelitis virus)禽腦脊髓炎病毒AEV抗體特價(jià)促銷(xiāo)

Saccharomyces paradoxus Bachinskaya, teleom ..Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG2',3'-二-O-乙酰基-5'-脫氧-5-氟-D-胞啶ADAM17/CD156b腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換酶特價(jià)促銷(xiāo)
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。