PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱：類鼻疽伯克霍爾德菌PCR試劑盒
英文名稱：詳見說明書
編號： FSP2566
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
Human MAP7 ELISA KitHuman LPAR4(Lysophosphatidic acid receptor 4) ELISA Kit雙(叔丁氧羰基)胺HBL-100

Human MAPK12 ELISA KitHuman Smad1/MADH1(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 1) ELISA Kit雙(叔丁氧羰基)胺TT

Human MAPK4 ELISA KitHuman Smad7/MADH7(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit1,3-dicyclohexyl-1H-imidazol-3-ium tetrafluoroborateCCD-1095Sk

Human MAPK13 ELISA KitHuman TNFAIP6(Tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein) ELISA Kit1,3-dicyclohexyl-1H-imidazol-3-ium tetrafluoroborateHs68

Human MAPK7 ELISA KitHuman AOC1(Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing]) ELISA Kit1,3-dicyclohexyl-1H-imidazol-3-ium tetrafluoroborateHFF

Human MAPK6 ELISA KitHuman MAOA(Amine oxidase [flavin-containing] A) ELISA Kit1,3-dicyclohexyl-1H-imidazol-3-ium tetrafluoroborateCaov-3

Human MAPKBP1 ELISA KitHuman CTXI(Cross Linked C-telopeptide of Type I Collagen) ELISA Kit1,4-二氧六環(huán)A2780

Human Marcks ELISA KitHuman GCK(Glucokinase) ELISA Kit1,4-二氧六環(huán)HO-8910
類鼻疽伯克霍爾德菌PCR試劑盒Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Rabbit Anti-pig IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的兔抗豬IgG 3-羥基異煙酸ABL2ABL2蛋白抗體特價促銷

Aciculoconidium aculeatum (Phaff et al.) Ki ..Rabbit Anti-pig IgG/HRP  辣根過氧化物酶標記的兔抗豬IgG 溴化吡斯的明ABI1ABI1/SSH3BP1蛋白抗體特價促銷

Neisseria flava Bergey et al.Rabbit Anti-pig IgG/FITC  FITC標記的兔抗豬IgG 3-羥基二苯基胺ACADS酰基輔酶A脫氫酶短鏈抗體特價促銷

Bartonella washoensisI/Rabbit Anti-pig IgG/Gold  膠體金標記的兔抗豬IgG 3-甲氧基二苯胺ABP/SHBG雄激素結(jié)合蛋白抗體特價促銷

Homo sapiens, humanRabbit Anti-pig IgG/RBITC  羅丹明標記的兔抗豬IgG 鹽酸米那普侖ACADM/MCAD?；o酶A脫氫酶中鏈抗體特價促銷

Curvularia inaequalis (Shear) Boedijn, anam ..Rabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗豬IgG 1-(2-氟苯基)哌嗪ACADL酰基輔酶A脫氫酶長鏈抗體特價促銷

Aspergillus ostianus Wehmer, anamorphRabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗豬IgG 5-甲基色胺鹽酸鹽ACADVL?；o酶A脫氫酶很長鏈抗體特價促銷

Pseudomonas cichorii (Swingle) StappRabbit Anti-pig IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗豬IgG N,N-二芐基乙醇胺ACAT1膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體特價促銷
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。