中文名稱:副流感病毒Ⅲ型PCR試劑盒 | 保存條件: 低溫冷藏 |
純度規(guī)格: 詳見說明書 | 產(chǎn)品類別: PCR試劑盒 PCR檢測試劑盒 |
產(chǎn)品名稱:副流感病毒Ⅲ型PCR試劑盒
英文名稱:詳見說明書
編號: FSP2496
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、產(chǎn)品僅供科研制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
兔海馬神經(jīng)元Human IL-20(Interleukin 20) ELISA Kit4,6-二氯吡啶-3-酰胺主動脈內(nèi)皮細(xì)胞
兔海綿體平滑肌細(xì)胞Human IL-22(Interleukin-22) ELISA KitD-半胱氨酸鹽酸鹽, 一水合物主動脈平滑肌細(xì)胞
兔頜下腺上皮細(xì)胞Human IL-24(Interleukin 24) ELISA KitD-半胱氨酸鹽酸鹽, 一水合物心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞
兔滑膜成纖維細(xì)胞Human IL-27(Interleukin-27 subunit alpha) ELISA Kit二苯基磷氧大隱靜脈平滑肌細(xì)胞
兔脊髓神經(jīng)元Human IL-28A(Interleukin-28A) ELISA Kit二苯基磷氧冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞
兔甲狀腺成纖維細(xì)胞Human IL-29(Interleukin 29) ELISA Kit二苯并噻吩腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞
兔甲狀腺上皮細(xì)胞Human IL-3(Interleukin 3) ELISA Kit二苯并噻吩淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞
兔角膜基質(zhì)細(xì)胞Human IL-31(Interleukin-31) ELISA KitD-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽淋巴管成纖維細(xì)胞
副流感病毒Ⅲ型PCR試劑盒Hypocrea stramineaMouse Anti-Rabbit IgM/Bio 生物素標(biāo)記的小鼠抗兔IgM N-乙烯基己內(nèi)酰胺四環(huán)素快速檢測試紙條(檢組織,檢測限30ppb,比色法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Mouse Anti-Rabbit IgM/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 2',4'-二氯苯乙酮氯霉素(CAP)快速檢測試紙條(檢雞蛋,檢測限0.5ppb,比色法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Mouse Anti-Rabbit IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 3,5-二甲基-4-羥基苯甲醛氯霉素(CAP)快速檢測試紙條(檢組織,檢測限0.1ppb,比色法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 1-(對甲苯磺酰)咪唑氯霉素(CAP)快速檢測試紙條(檢尿樣,檢測限0.1ppb,比色法)
Subulispora rectilineata TubakiMouse Anti-Rabbit IgM/APC APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 硫代甲肼氯霉素(CAP)快速檢測試紙條(檢尿樣,檢測限0.5ppb,消線法)
Prevotella enoeca MooreMouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 2-羥基異煙酸氟喹諾酮(QNS)快速檢測試紙條(檢雞蛋,檢測限5-20ppb,比色法)
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 乙二醇二縮水甘油醚氟喹諾酮(QNS)快速檢測試劑卡(檢雞蛋,檢測限60-100ppb,消線法)
Homo sapiens, humanMouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 對乙氧基苯硼酸氟喹諾酮(QNS)快速檢測試紙條(檢組織,檢測限5-20ppb,比色法)
成立日期 | 2012-05-02 (13年) | 注冊資本 | 550 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內(nèi) |
主營行業(yè) | 生化試劑,抗體,細(xì)胞培養(yǎng),分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué) | 經(jīng)營模式 | 貿(mào)易,工廠,試劑 |
產(chǎn)品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥3490 |
VIP5年
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上海澤葉生物科技有限公司
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2024-11-15 | |
¥3490 |
VIP1年
|
上海晶風(fēng)生物科技有限公司
|
2024-11-15 | |
¥3980 |
VIP3年
|
上海雅吉生物科技有限公司
|
2024-11-15 |