儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱(chēng)：大豆NOS/SS PCR試劑盒
英文名稱(chēng)：詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
編號(hào)： FSP2452
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞，HA-VSMC細(xì)胞anti- WBS15/LAT2 antibody1,8-二氨基萘兔輸尿管平滑肌細(xì)胞

人子宮頸癌細(xì)胞，HeLa細(xì)胞anti- WBSCR16 antibody2,5-二溴甲苯兔輸尿管上皮細(xì)胞

人子宮頸表皮癌細(xì)胞，MS751細(xì)胞anti- WBSCR17 antibody2,5-二溴甲苯兔髓核細(xì)胞

人子宮頸鱗癌細(xì)胞，SiHa細(xì)胞anti- WDFY3 antibody2,3-二溴吡啶兔外根鞘細(xì)胞

人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)，HCC94細(xì)胞anti- WDFY4 antibody2,3-二溴吡啶兔胃成纖維細(xì)胞

人子宮膜腺癌細(xì)胞，HEC-1-B細(xì)胞anti- WDR1 antibody6,7-二氫-4-苯并[b]噻吩酮兔胃黏膜上皮細(xì)胞

人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞，Ishikawa細(xì)胞anti- WDR13 antibody6,7-二氫-4-苯并[b]噻吩酮兔胃平滑肌細(xì)胞

人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞，RL95-2細(xì)胞anti- WDR16 antibodyDL-酪氨酸兔纖維環(huán)細(xì)胞
大豆NOS/SS PCR試劑盒Rhizopus oryzae Went et Prinsen Geerligs, t ..Donkey anti-Goat IgG whole serum  驢抗羊IgG抗血清 制霉素藥敏紙片口蹄疫3ABC病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

Phellinus chrysoloma (Fries) Donk, teleomor ..Donkey anti-Gpig IgG whole serum  驢抗豚鼠IgG抗血清 氨芐青霉素藥敏紙片豬乙腦病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

Dictyostelium magnum HagiwaraRabbit Anti-horse IgM  兔抗馬IgM 異丙醇鋁豬弓形蟲(chóng)病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

Corynebacterium glutamicum (Kinoshita et al ..Goat Anti-Bovine IgG  羊抗牛IgG 丁香醛連氮豬細(xì)小病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

Actinomadura viridilutea (Agre and Guzeva) ..Goat Anti-Mouse IgG  羊抗小鼠IgG 大孔樹(shù)脂XDA-1豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測(cè)試紙條

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Goat Anti-Mouse IgM  羊抗小鼠IgM D-酒石酸豬圓環(huán)病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

Streptomyces venezuelae Ehrlich et al.Goat Anti-rat IgG  羊抗大鼠IgG 愈創(chuàng)木酚豬傳染性胃腸炎病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

driedGoat Anti-Guinea pig IgG  羊抗豚鼠IgG 鄰苯二甲酸豬流行性腹瀉病毒抗體ELISA檢測(cè)試劑盒
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。