儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:馬媾疫錐蟲PCR試劑盒
英文名稱:Trypanosoma equiperdumPCR
編號: FSP2351
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
Rabbit Anti-dog IgG/HRP辣根過氧化物酶標記的兔抗狗IgG特價促銷anti- Tie2 antibody2-氯苯并噁唑5-甲基糠醛
Rabbit Anti-dog IgG/AP堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗狗IgG特價促銷anti- TIGD1 antibody2-氯苯并噁唑4-甲基-5-(2-乙酰氧乙基)噻唑
Rabbit Anti-dog IgG/Cy3Cy3標記的兔抗狗IgG特價促銷anti- TIGD5 antibody氯乙酰氯4,5-二甲基噻唑
Rabbit Anti-dog IgG/Cy5Cy5標記的兔抗狗IgG特價促銷anti- Tim23 antibodyε-己內(nèi)酯2,4,5-三甲基噻唑
Rabbit Anti-dog IgG/Cy5.5Cy5.5標記的兔抗狗IgG特價促銷anti- TIM3 antibodyε-己內(nèi)酯六溴環(huán)十二烷
Rabbit Anti-dog IgG/Cy7Cy7標記的兔抗狗IgG特價促銷anti- TIMELESS antibody2-氯-4-甲基-3-硝基吡啶粘氯酸
Rabbit Anti-dog IgG/PEPE標記的兔抗狗IgG特價促銷anti- TIMM10 antibody2-氯-4-甲基-3-硝基吡啶甲基丙二酸二乙酯
Rabbit Anti-dog IgG/PE-Cy3PE-Cy3標記的兔抗狗IgG特價促銷anti- TIMM13 antibody乙酸銅,一水合物(S)-(+)-2-氯苯甘氨酸甲酯
馬媾疫錐蟲PCR試劑盒Rat Interleukin 32,IL-32 ELISA試劑盒RASSF8 RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體3,3'-二氟聯(lián)苯長須白蛉探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Interleukin 4,IL-4 ELISA試劑盒Pan-ras Pan ras抗體2,6-二溴苯甲酸犬巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Interleukin 5,IL-5 ELISA試劑盒 RCC1 染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體1,3,6,8-四溴芘溶酪巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Interleukin 6,IL-6 ELISA試劑盒Phospho-RCC1 (Ser11) 磷酸化染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體7-甲氧基-3-苯磺酰-1(3H)-異苯并呋喃酮巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Interleukin 8,IL-8 ELISA試劑盒phospho-Rb(Ser249) 視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體4-chloro-3-methoxytoluene灰馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Interleukin 9,IL-9 ELISA試劑盒Phospho-Rb (Ser608) 磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體2-氯-1,4-苯二胺硫酸鹽足馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA試劑盒Phospho-Rb (Ser807/Ser811) 磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體吡啶-2-羧硫酸胺馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒
Rat Interleukin-7,IL-7 ELISA試劑盒Phospho-Rb (Thr821) 磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體2-甲基-4-氰基苯硼酸梅迪RT-維斯納病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
關(guān)鍵字: 馬媾疫錐蟲;PCR試劑盒;50T;FSP2351;
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