PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：斑點(diǎn)病密螺旋體PCR試劑盒
英文名稱：Treponema carateumPCR
編號(hào)： FSP2309
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
Goat Anti-Chicken IgG/Cy5.5Cy5.5標(biāo)記的羊抗雞IgG特價(jià)促銷anti- SUCLG1 antibody氰乙酸2-氯乙基乙烯基醚
Goat Anti-Chicken IgG/Cy7Cy7標(biāo)記的羊抗雞IgG特價(jià)促銷anti- SUCLG2 antibody氰乙酸烯丙基縮水甘油醚
Goat Anti-Chicken IgG/PEPE標(biāo)記的羊抗雞IgG特價(jià)促銷anti- SUDS3 antibody天然辣椒堿三乙二醇單乙醚
Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy3PE-Cy3標(biāo)記的羊抗雞IgG特價(jià)促銷anti- SUFU antibody順-2-丁烯-1,4-二醇雙(2-二苯基磷苯基)醚
Goat Anti-Chicken IgG/PE-CY5PE-CY5標(biāo)記的羊抗雞IgG特價(jià)促銷anti- SUGT1 antibody順-2-丁烯-1,4-二醇5-氨基-3-甲基異惡唑
Goat Anti-Chicken IgG/APCAPC標(biāo)記的羊抗雞IgG特價(jià)促銷anti- SULF2 antibody細(xì)胞色素C(馬心)3-氨基-5-甲基異惡唑
Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 350Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗雞IgG特價(jià)促銷anti- SULT1A1 antibody細(xì)胞色素C(牛心)苯基炔丙基醚
Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 488Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗雞IgG特價(jià)促銷anti- SULT1A1 antibody2-氯-1-(二甲氨基)丙烷鹽酸鹽4-羥基-3-叔丁基-苯甲醚
斑點(diǎn)病密螺旋體PCR試劑盒rat aldosterone,ALD ELISA試劑盒PDGF-BB 血小板源性生長(zhǎng)因子-BB抗體二甲基三硫 磺達(dá)肝癸鈉
Rat alkaline phosphatase,ALP ELISA試劑盒PDGFRA 血小板源性生長(zhǎng)因子受體A抗體(PDGFRα)2-巰基-5-氯苯并噻唑 7-溴-1，2，3，4-四氫喹啉鹽酸
Rat Alpha-fetoprotein,AFP ELISA試劑盒Phospho-PDGFRA(Tyr1018) 磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體苯并噻唑-2-甲醛 7-溴-2,4(1H,3H)-喹唑啉二酮
Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA試劑盒Phospho-PDGFRA(Tyr754) 磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體N-甲基吲哚 (E)-3-(叔丁基二甲基硅氧基)丙烯-1-基-硼酸頻哪醇酯
Rat alpha-L-fucosidase,AFU ELISA試劑盒Phospho-PDGFRA(Tyr849)/PDGFRB(Tyr857) 磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α/β抗體5-甲基-6,7-二氫-5H-環(huán)戊并吡嗪 N-CBZ-甘氨酸乙酯
Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA試劑盒Phospho-PDGFRA(Tyr988) 磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α4-甲氧基苯甲醇甲酸酯 3-Boc-6-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.1.0]己烷
Rat Amylin ELISA試劑盒Phospho-PDGFRA(Tyr572) 磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α2,2,3-三溴丙醛 2,3,6-三氟苯基乙酸
Rat amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA試劑盒Phospho-PDGFRA(Tyr762) 磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α1,3-雙(2,4-二氨基苯氧基)丙烷 伊班磷酸
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關(guān)鍵字： 斑點(diǎn)病密螺旋體;PCR試劑盒;50T;FSP2309;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒；另有針對(duì)各種動(dòng)物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。
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