PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱：奧斯特線蟲通用PCR定量試劑盒
英文名稱：Ostertagia spp.PCR
編號： FSP2007
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產品中所含的熒光染料在不結合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
IL-28B/IL-28C白細胞介素28B抗體特價促銷anti- OSBPL3 antibody偏釩酸銨二苯基硅烷
IL-29/IFNL1白細胞介素29抗體特價促銷anti- OSBPL9 antibody溴化鋁環(huán)氧溴丙烷
IL-31白細胞介素31抗體特價促銷anti- OSCP antibody溴化鋁1,2-雙(2-氰乙基硫)乙烷
IL-31RA/CRL3白介素31受體a抗體特價促銷anti- OSCP1 antibody5'-腺苷單磷酸一水合物1,3-二溴丁烷
IL-32/NK4白介素32抗體特價促銷anti- OSGEP antibody5'-腺苷單磷酸一水合物1-乙基金剛烷
IL-33/NFHEV白介素33抗體特價促銷anti- OSGEPL1 antibody5'-腺嘌呤核苷酸(3R)-(+)-3-(甲氨基)吡咯烷
IL-33白介素33抗體特價促銷anti- OSGIN1 antibody4-戊烯酸1,1-雙(3-環(huán)己基-4-羥苯基)環(huán)己烷
IL-1 Alpha白介素1α/IL-1α抗體特價促銷anti- OSMR antibody4-戊烯酸1,8-二乙酰氧基辛烷
奧斯特線蟲通用PCR定量試劑盒Human anti-prothrombins antibodies,aPT1/aPT2 ELISA試劑盒Calbindin/Calbindin D28k 鈣結合蛋白D28K抗體異丁酯丙烯酸L-Cystine L-胱氨酸
Human anti-Q fever antibody,anti-Q-Ab ELISA試劑盒Crk p38 /CRK Crk p38抗體異丁酯丙烯酸L-Cystine L-胱氨酸
Human anti-rabies virus antibody, anti-RV ELISA試劑盒phospho-Crk p38 (Tyr221) 磷酸化Crk p38抗體月桂酯Benzyltrimethylammonium chloride 芐基三甲基氯化銨
Human anti-red cell antibody ELISA試劑盒phospho-CRK (Ser41) 磷酸化CRK抗體月桂酯Benzyltrimethylammonium chloride 芐基三甲基氯化銨
Human anti-respiratory syncytial virus antibody,RSV ELISA試劑盒SLAMF6 SLAMF6抗體異癸酯醋酸洗必泰（醋酸氯己定）
Human anti-Reticulin antibody,ARA ELISA試劑盒CRMP2/DPYSL2 二氫嘧啶酶相關蛋白2抗體異癸酯孔雀石綠
Human anti-ribonucleo protein Antibody,RNP-Ab ELISA試劑盒Phospho-CRMP2 (Thr514) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體丙烯酸異癸酯Creatine 肌酸（無水）
Human anti-ribosomal P protein antibody,ARPA/Rib-P ELISA試劑盒CRLR/CGRPR1 降鈣素基因相關肽1型受體抗體丙烯酸異癸酯Tricine 三（羥甲基） 甲基甘氨酸
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
關鍵字： 奧斯特線蟲通用;PCR定量試劑盒;50T;FSP2007;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學院、復旦大學、上海交通大學醫(yī)學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫(yī)大學、南京大學，暨南大學，南京工業(yè)大學，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒，種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒；另有針對各種動物（鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚）的科研試劑。
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