儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱(chēng):新孢子蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):Neospora spp.PCR
編號(hào): FSP1975
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
phospho-HDAC1(Ser423+Ser421) 磷酸化組蛋白去乙?;?抗體特價(jià)促銷(xiāo)anti- NMT1 antibody2-氨基-4-羥基-6-甲基嘧啶長(zhǎng)春瑞濱
HDAC2/HD2組蛋白去乙?;?抗體特價(jià)促銷(xiāo)anti- NMU antibody2-氨基-4-羥基-6-甲基嘧啶三尖杉寧堿
phospho-HDAC2(Ser394)磷酸化組蛋白去乙?;?抗體特價(jià)促銷(xiāo)anti- NMUR1 antibody硫酸鋁鉀,十二水合物雙氫青蒿素
HDAC3/HD3組蛋白去乙?;?抗體特價(jià)促銷(xiāo)anti- NNMT antibody乙酰胺蒿甲醚
Phospho-HDAC3 (Ser424)磷酸化組蛋白去乙酰化酶3抗體特價(jià)促銷(xiāo)anti- nNOS antibody氧化鋁斯皮諾素
HDAC4組蛋白去乙?;?抗體特價(jià)促銷(xiāo)anti- NNT antibodyβ-淀粉狀蛋白25-35β-胡蘿卜素
HDAC5組蛋白去乙?;?抗體特價(jià)促銷(xiāo)anti- NO66/C14orf169 antibodyβ-淀粉狀蛋白25-35白花前胡丙素
HDAC6組蛋白去乙?;?抗體特價(jià)促銷(xiāo)anti- NOB1 antibodyβ-淀粉狀蛋白25-35異水飛薊賓
新孢子蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒Goat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA試劑盒CLIP1/CLIP170 細(xì)胞質(zhì)連接蛋白1抗體乙氧基化(30)雙酚A二丙烯酸酯Betamethasone 倍他米松
Goat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA試劑盒 Phospho-CDK2 (Thr160) 磷酸化周期素依賴(lài)性激酶2抗體乙氧基化(30)雙酚A二丙烯酸酯L-Aspartic acid sodium salt L-天門(mén)冬氨酸鈉鹽
Goat Interleukin 10,IL-10 ELISA試劑盒 Phospho-CDK2 (Thr14) 磷酸化周期素依賴(lài)性激酶2抗體乙氧基化(4)雙酚A二丙烯酸酯D-果糖-1,6-二磷酸三鈉鹽
Goat Interleukin 4,IL-4 ELISA試劑盒 CDK3 周期素依賴(lài)性激酶3抗體乙氧基化(4)雙酚A二丙烯酸酯D-果糖-1,6-二磷酸三鈉鹽
Goat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA試劑盒 CDK4 周期素依賴(lài)性激酶4抗體三羥甲基丙烷四丙烯酸酯Coumarin 6 香豆素6
Goat P-Selectin/CD62P/GMP-140 ELISA試劑盒CNTROB 乳腺癌易感基因2相互作用蛋白抗體三羥甲基丙烷四丙烯酸酯Minoxidil 米諾地爾
Goat Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA試劑盒 HEC1 癌細(xì)胞高表達(dá)蛋白Hec1抗體丙烯酸己內(nèi)酯Erioglaucine disodium salt 亮藍(lán)
Guinea Pig 50% complement hemolysis,CH50 ELISA試劑盒 CDK5 周期素依賴(lài)性激酶5抗體丙烯酸己內(nèi)酯3-Methyl-2-benzothialinone 酚試劑(3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽)
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
關(guān)鍵字: 新孢子蟲(chóng)通用;PCR檢測(cè)試劑盒;50T;FSP1975;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷(xiāo)售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷(xiāo)售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專(zhuān)門(mén)針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚(yú))的科研試劑。
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