PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：牛肺線蟲PCR試劑盒
英文名稱：Dictyocaulus viviparusPCR
編號(hào)： FSP1564
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
EFHC1EFHC1蛋白抗體特價(jià)促銷anti- DYNC1I1 antibody動(dòng)物細(xì)胞糖蛋白高碘酸希爾（PAS）法品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）染色試劑盒SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體

EFHC2EFHC2蛋白抗體特價(jià)促銷anti- DYNC1I2 antibody動(dòng)物組織石蠟切片糖蛋白高碘酸希爾（PAS）法 品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）染色試劑盒神經(jīng)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因1抗體

EFHD1EFHD1蛋白抗體特價(jià)促銷anti- DYNC1LI1 antibody動(dòng)物組織冰凍切片糖蛋白高碘酸希爾（PAS）法品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）染色試劑盒螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體

EF-CBP2突觸結(jié)合蛋白2抗體特價(jià)促銷anti- DYNC1LI2 antibody動(dòng)物全組織糖蛋白高碘酸希爾（PAS）法品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）染色試劑盒細(xì)胞粘附分子3抗體（脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白3）

IQCDIQCD蛋白抗體特價(jià)促銷anti- DYNC2LI1 antibody糖蛋白電泳高碘酸希爾（PAS）法品紅亞硫酸鹽（FUCHSIN SULFITE）染色試劑盒絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Nek3抗體

IQCEIQCE蛋白抗體特價(jià)促銷anti- DYNLL2 antibody聚糖對(duì)氨基苯甲酸（2-AA）熒光標(biāo)記試劑盒天冬氨酸蛋白酶ASP4抗體

IQCCIQCC蛋白抗體特價(jià)促銷anti- DYNLRB1 antibody聚糖對(duì)氨基苯甲酰胺（2-AB）熒光標(biāo)記試劑盒核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體

IQCA1IQCA1蛋白抗體特價(jià)促銷anti- DYNLT1 antibody聚糖鄰氨基吡啶（2-AP）熒光標(biāo)記試劑盒核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白3抗體
牛肺線蟲PCR試劑盒Human Osteoglycin ELISA KitASMTY/HIOMT  松果體N甲基乙酰羥色胺抗體2-噻吩乙醇香蒲新苷進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)Salmonella paratyphi a  型副傷寒沙門氏菌抗體含量：HPLC≥98%

Human ORC5L ELISA KitGNAO1/G0 Protein alpha   G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白O亞基A2抗體2-噻吩乙醇哈巴俄苷進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)Salmonella enteritidis/SE  腸炎沙門氏菌抗體含量：HPLC≥98%

Human ORC6 ELISA KitLPAP  淋巴細(xì)胞磷蛋白磷酸酶相關(guān)蛋白抗體2-噻吩乙醇哈巴苷進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)pig cholerae salmonella  豬霍亂沙門氏菌抗體含量：HPLC≥98%

Human OS9 ELISA KitPMA/Prostate Mucin Antigen  前列腺粘蛋白抗原抗體3,4,5-三甲氧基肉桂酸安格洛甙C進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)Duck salmonella  鴨沙門氏菌抗體含量：HPLC≥98%

Human OSBP ELISA KitSEMA4D/CD100  臂板蛋白4D抗體3,4,5-三甲氧基肉桂酸10-脫酰巴卡亭進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)USP3  去泛化酶3抗體含量：HPLC≥98%

Human OSBPL10 ELISA Kitp47-phox  NADPH氧化酶活化蛋白p47抗體三(羥甲基)甲基甘氨酸知母皂苷BII進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ATXN3L  小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體含量：HPLC≥98%

Human OSBPL11 ELISA KitAnkyrin B/Ankyrin brain  錨定蛋白B抗體三(羥甲基)甲基甘氨酸知母皂苷A3進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)Endomucin  內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體含量：HPLC≥98%

Human OSBPL2 ELISA KitFOXN1  叉頭蛋白N1抗體三(羥甲基)甲基甘氨酸麥冬皂苷A進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)KLK3/Prostate Specific Antigen  激肽釋放酶3/舒血管3抗體含量：HPLC≥98%
儲(chǔ)存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。