儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:嗜人錐蠅PCR檢測試劑盒
英文名稱:Cochliomyia hominivoraxPCR
編號: FSP1508
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
ODF2/Cenexin1尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體特價促銷anti- CYP17A1 antibody10倍蔗糖核酸電泳上樣緩沖液轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體
FAM84B/BCMP101癌膜相關(guān)蛋白101抗體特價促銷anti- CYP19A1 antibody6倍蔗糖DNA電泳上樣緩沖液小鼠抗丙酮酸激酶-M2抗體
TEF4/TEA domain family member 2轉(zhuǎn)錄增強因子TEF4抗體特價促銷anti- CYP1A1 antibody6倍聚蔗糖DNA電泳上樣緩沖液促黑細胞激素γ1抗體
FAM113AFAM113A蛋白抗體特價促銷anti- CYP1A2-Specific antibody6倍丙三醇DNA電泳上樣緩沖液促黑細胞激素γ抗體
FAM21CFAM21C蛋白抗體特價促銷anti- CYP1B1 antibody6倍堿性凝膠DNA電泳上樣緩沖液甲基苯丙胺抗體
FAM13C1FAM13C1蛋白抗體特價促銷anti- CYP20A1 antibodyRNA電泳樣品處理液轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子MRG15抗體
FAM161AFAM161A蛋白抗體特價促銷anti- CYP24A1 antibody分子生物級溴化乙錠(Ethidium Bromide)染色液(1毫克/毫升)或(10毫克/毫升)髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體
FAM59BFAM59B蛋白抗體特價促銷anti- CYP26B1 antibodySYBR綠色熒光核酸染色試劑盒(配制25毫升/次)組織相容性復(fù)合體β抗體
嗜人錐蠅PCR檢測試劑盒Human PREB ELISA KitBAZ/ACF1 溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體碲酸賴氨酸脫羧酶肉湯
Human PRKCDBP ELISA KitFAS/Apo-1/CD95 載脂蛋白1抗體Triphenylphosphine gold triflimide乳糖發(fā)酵管
Human PRKAR2B ELISA KitCPE 胰羧肽酶E抗體Triphenylphosphine gold triflimide氨基酸脫羧酶對照
Human LALBA(Alpha-lactalbumin) ELISA KitMyotilin 肌收縮蛋白MYOT抗體Triphenylphosphine gold triflimide尿素酶
Human PRELID1 ELISA KitPMCA 細胞膜鈣轉(zhuǎn)運ATP酶抗體氟化錫(II)甘露醇發(fā)酵管
Human DHH(Desert hedgehog protein) ELISA KitGABRA3/GABA A Receptor alpha 3 G氨基丁酸受體α3抗體氟化錫(II)半固體瓊脂
Human PPP4R2 ELISA KitNCEH/AADACL1 中性膽固醇酯水解酶1抗體氟化錫(II)色氨酸肉湯
Human PRKG2 ELISA KitRab25 癌基因RAS相關(guān)蛋白Rab25抗體氟化錫(II)乳糖發(fā)酵管
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
關(guān)鍵字: 嗜人錐蠅;PCR檢測試劑盒;50T;FSP1508;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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