儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 產(chǎn)品僅供科研血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱:肺炎嗜衣原體PCR檢測試劑盒
英文名稱:Chlamydophila pneumoniae PCR
編號: FSP1477
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
ARSA芳香基硫酸酯酶1抗體特價促銷anti- COX6A2 antibody體外脘蛋白轉化(in vitro conversion)分析試劑盒酪氨酸磷酸酶受體相互作用蛋白Liprin α1抗體
ATE1精氨酸t(yī)RNA的蛋白轉移酶1抗體特價促銷anti- COX6B1 antibody脘蛋白糖基化定性分析試劑盒受體蛋白酪氨酸磷酸酶F抗體
ATX2脊髓小腦共濟失調(diào)2型蛋白抗體特價促銷anti- COX6B2 antibody脘蛋白糖基化分型(glycoform)試劑盒富含亮氨酸重復跨膜神經(jīng)元蛋白3抗體
ATXN7L1共濟失調(diào)蛋白7樣1抗體特價促銷anti- COX6C antibody細胞脘蛋白(PRION)蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒低密度脂蛋白受體5樣蛋白抗體
ATXN7L2共濟失調(diào)蛋白7樣2抗體特價促銷anti- COX7A1 antibody載玻片細胞脘蛋白(PRION)蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎蛋白抗體
BCNPB淋巴細胞新型蛋白1抗體特價促銷anti- COX7A2L antibody冰凍切片組織脘蛋白(PRION)蛋白表達熒光 自噬微管相關蛋白輕鏈3A/3B抗體
BEX4腦表達X連鎖蛋白4抗體特價促銷anti- COX7B antibody顯微鏡檢測試劑盒磷酸化富亮氨酸重復激酶2抗體
ABCA5三磷酸腺苷結合盒轉運蛋白A亞基5抗體特價促銷anti- COX7C antibody石蠟切片組織脘蛋白(PRION)蛋白表達熒光 指甲髕骨綜合征相關蛋白NPS1抗體
肺炎嗜衣原體PCR檢測試劑盒Human RBM15 ELISA KitTROP2/TACD2 細胞表面糖蛋白Trop2抗體(胰腺癌標志物蛋白)氮化硅消毒液中和肉湯
Human RASIP1 ELISA KitSHC3 SH2結構域蛋白C3抗體蘇丹I沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(含氯霉素)
Human RASAL2 ELISA KitZNF379/ZDHHC9 鋅指蛋白379抗體蘇丹紅I肝肉瓊脂培養(yǎng)基
Human RASSF4 ELISA Kitphospho-LSP1 (Ser204) 磷酸化白細胞F肌動蛋白結合蛋白抗體焦亞硫酸鈉溴甲酚紫葡萄糖瓊脂
Human RBBP6 ELISA KitAEBP1 脂肪細胞增強結合蛋白1可溶性淀粉muller-kaufmann氏四硫磺酸鈉肉湯
Human RASEF ELISA KitCARD11 凋亡加強結構域蛋白11抗體可溶性淀粉抗生素檢定培養(yǎng)基6號(PH7.2-7.4)
Human RASGEF1A ELISA KitCIKS 核因子NFκB激活蛋白1抗體乙醇鈉含糖牛肉湯培養(yǎng)基
Human RBBP8 ELISA KitMYBBP1A/p53 activated protein 2 p53激活蛋白2抗體亞磷酸鈉,五水合物石蕊牛奶培養(yǎng)基
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結合DNA 時,吸收光譜在 471nm,結合 DNA 時的吸收光譜在 500nm,發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
關鍵字: 肺炎嗜衣原體;PCR檢測試劑盒;50T;FSP1477;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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