抗體的制備過程：

1. 免疫原的制備

普通的大分子蛋白，產品僅用于科研通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。

小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物

常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集

一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定

得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存

建議將抗體分裝后進行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。

參數(shù)規(guī)格：

產品應用   ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復）
英文名稱  Anti-CK12/Cytokeratin 12 

中文名稱  細胞角蛋白12抗體  

別    名  65 kDa cytokeratin; CK 12; CK 3; CK12; CK3; Cytokeratin 12; Cytokeratin 3; K12; K3; keratin 12 (Meesmann corneal dystrophy); Keratin 12; Keratin 3; Keratin, type I cytoskeletal 12; K1C12_HUMAN; Keratin, type II cytoskeletal 3; KRT12; KRT3.

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg  

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit   

產品類型  一抗    
研究領域  細胞生物 信號轉導 細胞類型標志物 細胞骨架  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 54kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human CK12/Cytokeratin 12

亞    型  IgG

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

抗體分子標記技術：

（一）原理

產品僅用于科研當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。

抗體制備過程：

1.材料與試劑

  a．提取的動物 Ig

  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑

  c．青霉素和鏈霉素

  d．實驗動物 兔

  e．其它材料及試劑

2、選擇實驗活體。

3、進行動物免疫實驗。

4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。

5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

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細胞角蛋白12抗體 Tricholoma│myomyces (Pers.) J.E. Lange種屬:Tricholoma│myomyces (Pers.) J.E. Lange

分離基物:子實體

提供形式:斜面培養(yǎng)物

安全等級:1

模式菌株:no

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:14

生長條件:25

存儲條件:定期移植法棕灰口蘑