抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體
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英文名稱
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Anti-CCDC135
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-CCDC135
中文名稱 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體
別 名 C16orf50; Chromosome 16 open reading frame 50; Coiled coil domain containing 135; DKFZp434I099; OTTHUMP00000164678; CC135_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 103kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CCDC135
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
下列是卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
1,1-二氯乙烯溶液 1.2ml Acinetobacter spp.不動(dòng)桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒
反-1,2-二氯乙烯溶液 1.2ml Acinetobacter spp.不動(dòng)桿菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
1,2-二氯丙烷溶液 1.2ml Acremonium strictum枝頂孢霉PCR試劑盒
1,3-二氯丙烷溶液 1.2ml Acremonium strictum枝頂孢霉染料法熒光定量PCR試劑盒
一溴一氯甲烷溶液 1.2ml Acremonium strictum枝頂孢霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
對(duì)異丙基甲苯溶液 1.2ml Actinobacillus actinomycetemcomitans伴放線放線桿菌PCR試劑盒
二氯甲烷溶液 1.2ml Actinobacillus actinomycetemcomitans伴放線放線桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒
正丁基苯溶液 1.2ml Actinobacillus actinomycetemcomitans伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
仲丁基苯溶液 1.2ml Actinobacillus pleuropneumoniae豬胸膜肺炎放線桿菌PCR試劑盒
叔丁基苯溶液 1.2ml Actinobacillus pleuropneumoniae豬胸膜肺炎放線桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒
鄰氯甲苯溶液 1.2ml Actinobacillus pleuropneumoniae豬胸膜肺炎放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
對(duì)氯甲苯溶液 1.2ml Actinomadura madurae馬杜拉放線菌PCR試劑盒
1,2-二溴-3-氯丙烷溶液 1.2ml Actinomadura madurae馬杜拉放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒
1,2-二溴乙烷溶液 1.2ml Actinomadura madurae馬杜拉放線菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
1,1,1,2-四氯乙烷溶液 1.2ml Actinomadura pelletieri白樂(lè)杰馬杜拉放線菌PCR試劑盒
駱駝脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒英文名稱:Camel lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit 特價(jià)促銷
駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒英文名稱:Camel transforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒英文名稱:Equine amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit進(jìn)口/分裝
馬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒英文名稱:Equine Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit進(jìn)口/原裝
馬免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒英文名稱:Equine Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
馬生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒英文名稱:Equine growth hormone,GH ELISA Kit進(jìn)口/原裝
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體 Bacillus│thuringiensis subsp. japanensis et al.種屬:Bacillus│thuringiensis subsp. japanensis et al.
分離基物:土壤
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:2
生長(zhǎng)條件:30
存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法蘇云金芽孢桿菌日本亞種