抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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細(xì)胞色素c氧化酶5A抗體
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英文名稱
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Anti-COX5A
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-COX5A
中文名稱 細(xì)胞色素c氧化酶5A抗體
別 名 COX; COX VA; COX5A; COX5A_HUMAN; Cytochrome c oxidase polypeptide Va; Cytochrome c oxidase polypeptide, mitochondrial; Cytochrome c oxidase subunit 5A; Cytochrome c oxidase subunit 5A, mitochondrial; mitochondrial; Mitochondrial cytochrome c oxidase subunit Va; VA.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 線粒體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 12kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human COX5A
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是細(xì)胞色素c氧化酶5A抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
生活飲用水中菌落總數(shù) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件pUbi探針法熒光定量PCR試劑盒
生活飲用水中大腸埃希氏菌 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件Rice Actin 1啟動(dòng)子LAMP試劑盒
凍干粉中腸道侵襲性大腸埃希氏菌(陽性) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件Rice Actin 1啟動(dòng)子PCR試劑盒
化妝品中銅綠假單胞菌(陽性) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件Rice Actin 1啟動(dòng)子染料法qPCR試劑盒
化妝品中金黃色葡萄球菌(陽性) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件Rice Actin 1啟動(dòng)子探針法qPCR試劑盒
乳粉中霉菌和酵母計(jì)數(shù) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件RuBiSCo啟動(dòng)子LAMP試劑盒
乳粉中乳酸菌計(jì)數(shù)(雙歧桿菌計(jì)數(shù)) 50g 轉(zhuǎn)基因元件RuBiSCo啟動(dòng)子PCR試劑盒
凍干粉中腸道出血性大腸埃希氏菌(陽性) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件RuBiSCo啟動(dòng)子染料法qPCR試劑盒
乳粉中蠟樣芽胞桿菌(定量) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件RuBiSCo啟動(dòng)子探針法qPCR試劑盒
凍干粉中霉菌和酵母計(jì)數(shù) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件SSU啟動(dòng)子LAMP試劑盒
乳粉中克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)(陽性) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件SSU啟動(dòng)子PCR試劑盒
凍干粉中克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)(陽性) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件SSU啟動(dòng)子染料法qPCR試劑盒
乳粉中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(陽性) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件SSU啟動(dòng)子探針法qPCR試劑盒
凍干粉中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(陽性) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tE9 LAMP試劑盒
凍干粉中副溶血性弧菌(陽性) 真空西林瓶 轉(zhuǎn)基因元件tE9 PCR試劑盒
人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA試劑盒英文名稱:MAX dimerization protein 1,mxd1 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒英文名稱:Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒英文名稱:NOD-like receptor9,NLR ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)ELISA試劑盒英文名稱:anti-Nogo-A antibody,NOGO-A Ab ELISA Kit特價(jià)促銷
人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒英文名稱:N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA Kit特價(jià)促銷
人N端外顯肽(Ext-N)ELISA試劑盒英文名稱:N-terminal extein,Ext-N ELISA Kit特價(jià)促銷人他克莫司(FK506)ELISA試劑盒 組裝/原裝
人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA試劑盒 組裝/原裝
人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒 組裝/原裝
人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞色素c氧化酶5A抗體 Monilinia laxa (Aderh. & Ruhland) Honey種屬:Monilinia laxa (Aderh. & Ruhland) Honey
分離基物:自然發(fā)病果
提供形式:斜面培養(yǎng)物
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
生長條件:22-26℃,好氧
存儲條件:定期移植法核果褐腐病菌