抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng)
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細(xì)胞分裂核仁蛋白1抗體
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英文名稱(chēng)
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Anti-DENTT
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱(chēng) Anti-DENTT
中文名稱(chēng) 細(xì)胞分裂核仁蛋白1抗體
別 名 CASK interacting nucleosome assembly protein; CINAP; CDA1; Cell division autoantigen 1 nucleolar protein; CTCL tumor antigen se20-4; DENTT; Differentially-expressed nucleolar TGF-beta1 target protein; Nuclear protein of 79 kDa; TSPY-like 2; TSPY-like protein 2; Tspyl2; Testis-specific Y-encoded-like protein 2; Cutaneous T-cell lymphoma-associated antigen se20-4; SE20 4; SE204; CTCL-associated antigen se20-4; NP79; TSYL2_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類(lèi)型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類(lèi)型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 76kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DENTT
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
下列是細(xì)胞分裂核仁蛋白1抗體 的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品:
膦酰二肽鈉 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.99純度:≥97%
癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
德羅特韋(GSK1349572,DTG) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
十二基吡喃葡萄糖苷;月桂?;咸烟?nbsp; 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
羥乙基纖維素(20000~30000 mpa.s) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:粘度20000~30000 mpa.s純度:≥97%
羥乙基纖維素(55006500 mpa.s) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:粘度55006500 mpa.s純度:≥98%
羥乙基纖維素(40~60 mpa.s) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:粘度40~60 mpa.s純度:≥98%
異丙基βD代半乳糖苷(IPTG) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
甘露糖;D甘露糖 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
D甘露糖(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥95%
N辛?;鵑基葡糖(MEGA8) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:≥97% ,進(jìn)分純度:≥98%
N癸?;鵑基葡糖(MEGA10) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
辛基βD代吡喃葡萄糖苷 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
D綿子糖五水;蜜三糖五水 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
D山梨 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:99%
n辛基βD吡喃葡萄糖苷(OGP) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,用于蛋白分析純度:≥98%
PDCD2L/MGC13096 程序性細(xì)胞死亡2一抗 特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml CFDA SE;Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester
SLTM 轉(zhuǎn)綠調(diào)節(jié)因子SLTM一抗 特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml CAPE (Caffeic Acid Phenethylester)
GPR65 G蛋白偶聯(lián)受體65一抗 特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Sulfameter
AX2R/LOC389289 膜粘連蛋白2受體一抗 特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Amitraz
NADE/NGFRAP1 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體相關(guān)蛋白1一抗 特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Amitraz
NRH2 死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2一抗 特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Citric acid monohydrate
PGRPS 肽聚糖識(shí)別蛋白1一抗 特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Salubrinal
Porimin 前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白一抗 特價(jià)促銷(xiāo) 0.2ml Primaquine phosphate
人沙眼衣原體(CT)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Chlamydia trachomatis,CT ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
人沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):Chlamydia trachomatis,CT ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒英文名稱(chēng):sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Salmonella typhi antigen,St-Ag ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)
人上皮膜抗原(EMA)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Epithelial membrane antigen,EMA ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):epithelial specific antigen,ESA ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)人壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(ANCE)ELISA試劑盒 組裝/原裝
人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 組裝/原裝
人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA試劑盒 組裝/原裝
人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)ELISA試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞分裂核仁蛋白1抗體 Fomes fomentarius (L.) J. Kickx f.種屬:Fomes fomentarius (L.) J. Kickx f.
分離基物:樺枯立木
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件:25-28℃,好氧
存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法木蹄層孔菌(斜面)