抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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接頭蛋白CrkL抗體
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英文名稱
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Anti-Crkl
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-Crkl
中文名稱 接頭蛋白CrkL抗體
別 名 Crk L; Crk like protein; Crkol; HGNC:2363; Oncogene CrkL; V crk avian sarcoma virus CT10 oncogene homolog like; V crk sarcoma virus CT10 oncogene homolog avian like; CRKL_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 腫瘤 免疫學 信號轉導 轉錄調節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 33kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Crkl(223-278aa)
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
下列是接頭蛋白CrkL抗體 的相關熱銷產(chǎn)品:
高峰淀粉酶來源于米曲霉(4000U/g) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,4000u/g純度:98%
高峰淀粉酶來源于米曲霉(100U/mg ) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,100 U/mg純度:≥98%
甘油醛3脫酶 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,75U/MG純度:≥98%
菠蘿蛋白酶 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>500U/MG,BR純度:≥98%
輔羧酶;羧化輔酶;焦素 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
吲哚乙 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.97純度:≥97%
α環(huán)糊精 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:>98% >94%
黃嘌呤氧化酶(XOD) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,>7U/MG, powder純度:≥97%
酰化酶,L氨基?;? 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:酶活力≥30000u/g純度:≥94%
胰蛋白酶1:250 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>250U/mg,BR純度:≥95%
胰蛋白酶1:2500 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>2500U/MG純度:≥95%
阿利多 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:98%
核糖核酶A(美侖);RNase A;核糖核酶I 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥50 U/mg,美侖純度:98%
5‘吡哆醛,一水 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉;(羅氏) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,羅氏進分純度:≥98%
NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉;(美侖) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97%,國產(chǎn)美侖純度:≥98%
CARM1 蛋白精氨N基4一抗 特價促銷 0.1ml Agarose
BTN2A2 嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2一抗 特價促銷 0.2ml PEG 400
AMPK alpha 1/PRKAA1 腺苷單活化蛋白激酶α1一抗 特價促銷 0.1ml Cholestyramine resin
phosphoAMPK alpha 1(Thr172) 化腺苷單活化蛋白激酶α1一抗 特價促銷 0.1ml Sucrose
TP53TG3 p53靶蛋白3一抗 特價促銷 0.2ml D(+)Trehalose, dihydrate
TP53TG5 p53靶蛋白5一抗 特價促銷 0.2ml Sodium chloride
TSPYL5 特異性Y蛋白樣5一抗 特價促銷 0.2ml Guanidine hydrochloride
UBTD1 泛素結構域蛋白1一抗 特價促銷 0.2ml Adonitol
人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒 英文名稱:total prostate s pecific antigen,tPSA ELISA Kit進口/分裝
人足細胞標記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒英文名稱:Podocalyxin,PCX ELISA Kit特價供應
人組胺(HIS)ELISA試劑盒英文名稱:Histamine,HIS ELISA Kit 特價促銷
人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒英文名稱:histon-H2b ELISA Kit進口/原裝
人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒 英文名稱:cathepsin D,cath-D ELISA Kit進口/分裝
人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒 英文名稱:Cathepsin K,cath-K ELISA Kit特價促銷小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 組裝/原裝
小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 組裝/原裝
接頭蛋白CrkL抗體 Gliocladium│virens J. H. Mill. Giddens & A. A. Foster種屬:Gliocladium│virens J. H. Mill. Giddens & A. A. Foster
分離基物:根際
提供形式:斜面培養(yǎng)物
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:14
生長條件:25-28
存儲條件:定期移植法綠粘帚霉