抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
20號染色體開放閱讀框79抗體 別 名 Chromosome 20 open reading frame 79; dJ1068E13.2; HSD22; Hypothetical protein LOC140856; MGC138229; OTTHUMP00000030367; Sterol carrier protein 2 like protein; Uncharacterized protein C20orf79.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-C20orf79
中文名稱 20號染色體開放閱讀框79抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 18kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C20orf79
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
碘化鉀溶液(1/60mol/L(0.1N)) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:1/60mol/L(0.1N)純度:≥98%
玫紅(AR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:≥98%
玫紅(指示劑級) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:指示劑級純度:0.97
草鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.96%純度:0.97
百里香藍(lán)(IND) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥97%
百里香藍(lán)(ACS reagent,95 %) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:ACS reagent,95 %純度:≥95%
喹哪啶紅 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:≥98%
酞(98%) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%純度:≥98%
四溴藍(lán) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:98%
百里香酞 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:AR;IND純度:≥95%
釷試劑 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.9純度:≥95%
鈦鐵試劑(AR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:≥98%
鈦鐵試劑(95%) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.95純度:≥95%
四溴酞乙鉀 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥92%
金蓮橙O 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:≥98%
試劑(AR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:≥98%
FMRP/FMR1 脆性X智力低下蛋白一抗 特價促銷 0.2ml Sudan II /Solvent Orange 7
IFRD1 干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1一抗(神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白PC4) 特價促銷 0.2ml Sudan3
PERP/p53 apoptosis effector related to PMP22 p53凋亡相關(guān)作用蛋白PMP22一抗 特價促銷 0.1ml Sudan IV/Solvent Red 24
phosphoGATA4(ser 262) 化GATA結(jié)合蛋白4一抗 特價促銷 0.1ml Oil red O/Solvent Red 27
GPR109A/Puma gamma G蛋白偶聯(lián)受體109A一抗 特價促銷 0.2ml Sudan red G/Solvent Red 1
SCN3B 電壓門控鈉通道SCN3B蛋白一抗 特價促銷 0.2ml Sudan Black B /Solvent Black 3
TIS11D/ERF2 表皮生長因子反應(yīng)蛋白2一抗 特價促銷 0.2ml Sudan Red B/Solvent Red 25
xCT/CCBR1 鈣離子通道阻端耐藥蛋白CCBR1一抗 特價促銷 0.2ml Sudan Red 7B/Solvent Red 19
HPSMC miRNA 人前列腺平滑肌細(xì)胞微小RNA 規(guī)格:2 µg
HCO miRNA 人顱骨造骨細(xì)胞微小RNA 規(guī)格:2 µg
HS miRNA 人滑膜細(xì)胞微小RNA 規(guī)格:2 µg
HNPC miRNA 人髓核細(xì)胞微小RNA 規(guī)格:2 µg
HHSEC miRNA 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞微小RNA 規(guī)格:2 µg
HIBEpiC miRNA 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞微小RNA 規(guī)格:2 µg
HH miRNA 人肝細(xì)胞微小RNA 規(guī)格:2 µg
20號染色體開放閱讀框79抗體 Enterobacter│cloacae (Jordan) Hormaeche and Edwards種屬:Enterobacter│cloacae (Jordan) Hormaeche and Edwards
分離基物:葉片
提供形式:斜面培養(yǎng)物
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:益生菌
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:141
生長條件:32
存儲條件:定期移植法#陰溝腸桿菌