抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
|
1號(hào)染色體開放閱讀框146抗體
|
英文名稱
|
Anti-C1orf146
|
規(guī)格
|
0.2ml/200μg
|
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-C1orf146
中文名稱 1號(hào)染色體開放閱讀框146抗體
別 名 C1orf146; CA146_HUMAN; Chromosome 1 open reading frame 146; RP11-163M2.3; RP11-163M2.4; Uncharacterized protein C1orf146.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 20kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C1orf146
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是1號(hào)染色體開放閱讀框146抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
反式玉米素 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)純度:97%
亞鉑鉀 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉純度>99.95% 純度:≥98%
環(huán)黃芪 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥98%
馬兜鈴A 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥98%
羥基茜草素/紅紫素(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥98%
棗仁皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥97%
偽原薯蕷皂苷 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:95%
氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥98%
3異倒捻子素 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:95%
柚皮苷二查爾 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥98%
潮霉素B(羅氏原裝) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:羅氏原裝,濃度50mg/ml純度:≥98%
芹菜苷; 芹黃苷 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥98%
柯伊利素7O葡萄糖苷,野決明苷 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥97%
山柰3O蕓香糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:97%
泮托拉唑鈉一水物 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:97%
泮托拉唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:含量測定,一水物純度:95%
DDIT4L DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4一抗 特價(jià)促銷 0.2ml Oxybutynin HCl
DEAF1/Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1 畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1一抗 特價(jià)促銷 0.2ml Oxybutynin HCl
EID3 E1A樣分化抑制因子3一抗 特價(jià)促銷 0.2ml Paroxetine HCl
ERCC6L 發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L一抗(乙致畸因子) 特價(jià)促銷 0.2ml Paroxetine HCl
FAM107A 腎細(xì)胞癌下調(diào)蛋白1一抗 特價(jià)促銷 0.2ml Piroxicam
FRK/PTK5 胃腸道相關(guān)酪氨激酶一抗(蛋白酪氨激酶5) 特價(jià)促銷 0.2ml Piroxicam
GANP 生發(fā)中心相關(guān)核蛋白MCM3一抗 特價(jià)促銷 0.2ml Posaconazole
GIDRP88 生長抑制和分化相關(guān)蛋白一抗 特價(jià)促銷 0.2ml Posaconazole
小鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)元5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠腦血管周細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠皮膚成纖維細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠脾基質(zhì)細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
1號(hào)染色體開放閱讀框146抗體 Aciculosporium│take I. Miyake種屬:Aciculosporium│take I. Miyake
分離基物:竹叢枝頂端葉鞘
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:14
生長條件:25
存儲(chǔ)條件:定期移植法竹針孢座囊菌