蛋白質(zhì)非標(biāo)記定量技術(shù)（Label Free）是通過液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對蛋白質(zhì)酶解肽段進(jìn)行質(zhì)譜分析，無需使用昂貴的穩(wěn)定同位素標(biāo)簽做內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)，只需分析大規(guī)模鑒定蛋白質(zhì)時所產(chǎn)生的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，比較不同樣品中相應(yīng)肽段的信號強(qiáng)度，從而對肽段對應(yīng)的蛋白質(zhì)進(jìn)行相對定量。 基于SILAC和iTRAQ的定量蛋白組學(xué)研究技術(shù)都是首先標(biāo)記蛋白然后利用質(zhì)譜進(jìn)行分析；盡管提供的蛋白定量信息量巨大，但是標(biāo)記試劑比較昂貴，每一個樣品的成本較大，因此比較適合在整個蛋白組水平上對蛋白的表達(dá)變化進(jìn)行定量的分析；對于相對簡單的蛋白混合物，比如說co-IP的樣品來說，投入產(chǎn)出比比較低；對于某些翻譯后修飾方式的蛋白組學(xué)研究來說，比如泛素化研究，本身泛素化就是發(fā)生在賴氨酸上側(cè)鏈上，對于泛素化肽段的富集是利用針對賴氨酸側(cè)鏈上殘留的兩個甘氨酸（gly-gly）的抗體來實現(xiàn)的，但是iTRAQ試劑的標(biāo)記會對此富集過程產(chǎn)生很大的影響，因此就不能使用iTRAQ標(biāo)記技術(shù)對組織樣品的泛素化修飾進(jìn)行組學(xué)水平上的分析。Label Free定量分析技術(shù)就是基于此實驗需求建立起來的定量蛋白組學(xué)技術(shù)。 同一個肽段在質(zhì)譜分析過程中離子化效率相同，質(zhì)譜峰的面積就直接代表了該肽段量的多少，因此可以直接通過比較同一肽段質(zhì)譜峰面積的方法直接得到該肽段所代表的蛋白的相對定量信息。 百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusion質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，推出基于Label Free的定量蛋白組分析服務(wù)技術(shù)包裹，您只需要將您的實驗?zāi)康母嬖V我們并將您的細(xì)胞寄給我們，我們會負(fù)責(zé)項目后續(xù)所有事宜，包括細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞標(biāo)記、蛋白提取、蛋白酶切、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學(xué)分析。
1. 如果您提供的是co-IP樣品，蛋白需求量在2-5ug左右，在寄送蛋白樣品中不要包含去污劑（例如SDS）以及高的氧濃度；或者您可以直接將含有蛋白樣品的beads寄給我們，由我們負(fù)責(zé)后續(xù)的實驗。 2. 如果您提供的是組織樣品，請您干冰將組織樣品寄給我們；動物樣本大于200mg，血液樣品至少1ml(血漿注意用EDTA防凝)，血清0.2-0.5ml，尿液2ml，植物樣品至少1g，細(xì)胞樣品為1X107個細(xì)胞，酵母、微生物等干重200mg。 3. 如果您提供的是蛋白樣品，請您保證蛋白總量在50ug以上；蛋白提取時使用普通的組織、細(xì)胞裂解液即可。 4. 樣品運(yùn)輸：請使用足量的干冰運(yùn)輸，并且盡量選用較快的郵遞方式，以降低運(yùn)輸過程中樣品降解的可能性。
在技術(shù)報告中，百泰派克會為您提供詳細(xì)的中英文雙語版技術(shù)報告，報告包括： 1. 實驗步驟（中英文） 2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)（中英文） 3. 鑒定的磷酸化位點的詳細(xì)信息 4. 質(zhì)譜圖片 5. 原始數(shù)據(jù)
您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務(wù)完成：樣品處理-上機(jī)分析-數(shù)據(jù)分析-項目報告
北京百泰派克生物科技有限公司
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